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背景临床研究表明,血压波动性增高能够导致学习记忆功能障碍,但具体机制不清。已有研究血小板释放丛集蛋白和β-淀粉样蛋白,和血小板共同作用形成纤维状β-淀粉样蛋白沉积于脑血管内皮,导致大鼠学习记忆功能的减退。结合前期“血压波动性增高活化血小板”的研究,提出假说,血压波动性增高致大鼠学习记忆功能减退有血小板机制的参与。目的研究血压波动性增高对大鼠学习记忆功能的影响及血小板参与机制。方法(1)建立SD大鼠去窦弓神经(Sinoaortic denervated,SAD)模型,分为假手术组,SAD组。大鼠SAD两周后,应用清醒大鼠血流动力学监测手段,测量大鼠动脉收缩压(systolic blood pressure,SBP)、舒张压(diastolic blood pressure,DBP)、平均压(mean blood pressure,MBP)、收缩压变异性(systolic blood pressure variability,SBPV)、舒张压变异性(diastolic blood pressure variability,DBPV)和平均压变异性(mean blood pressure variability,MBPV)。应用水迷宫、明暗穿梭箱、新物体识别3种行为学方法分别在第2周、第4周、第8周和第16周检测大鼠的学习记忆功能。随后分别在第2周、4周、8周和16周四个时间点处死大鼠检测海马和大脑皮层β-淀粉样蛋白(β-Amyloid,Aβ)含量、血浆中Aβ及丛集蛋白水平、血小板内淀粉样前体蛋白水平、血小板释放Aβ及丛集蛋白改变、血小板培养液中纤维状Aβ形成比,最后脑组织切片进行Aβ和vWF荧光双染,计算血管内皮Aβ沉积比。(2)另将术后2周动物,随机分为Sham、SAD和SAD+尼莫地平(20mg/kg/d)3组,N=4,灌胃给药30天,同上检测各指标变化。结果1.血流动力学结果:与假手术组比较,SAD组大鼠SBP、DBP和MBP无显著性差异,但SBPV、DBPV和MBPV显著增高(P<0.01),压力感受性反射敏感性降低(P<0.01),血压升高50mmHg时心率降低小于20次/分,提示血压波动性增高大鼠模型是成功的。2.行为学实验结果:(1)水迷宫实验:空间定位航行实验中,与Sham组相比,SAD组大鼠术后第8周和第16周逃避潜伏期明显延长(P<0.05,P<0.01);空间探索实验中,与Sham组相比,SAD组大鼠术后第8周和第16周平台穿越次数明显减少(P<0.05);各时间段游泳速度没有统计学差异。(2)明暗穿梭箱实验:给电刺激后,与Sham组相比,SAD组大鼠术后第2周、4周、8周和16周进暗箱潜伏期显著缩短(P<0.05)。(3)新物体识别实验:与Sham组相比,SAD组大鼠术后第16周的物体识别指数显著降低(P<0.05)。(4)给药尼莫地平后:1)水迷宫空间定位航行实验中,与Sham组相比,SAD组大鼠逃避潜伏期明显延长(P<0.05),给药组较模型组逃避潜伏期明显缩短(P<0.05);空间探索实验中,与Sham组相比,SAD组大鼠平台穿越次数明显减少(P<0.05),给药组较模型组平台穿越次数显著增加(P<0.05);各组游泳速度没有统计学差异。2)明暗穿梭箱实验给电刺激后,与Sham组相比,SAD组大鼠进暗箱潜伏期明显缩短(P<0.05),给药组较模型组进暗箱潜伏期延长(P<0.01)。3)新物体识别实验结果显示:与Sham组相比,SAD组大鼠识别指数显著减少(P<0.05),给药组较模型组识别指数明显增加(P<0.05)。3.血浆指标结果:与Sham组相比,SAD组大鼠血浆中第8周和16周Aβ和丛集蛋白含量显著增加(P<0.05,P<0.01);给药尼莫地平后,与SAD组相比,SAD+尼莫地平组大鼠血浆中Aβ和丛集蛋白含量明显减少(P<0.05)。4.血小板指标结果:与Sham组相比,SAD组血小板内淀粉样前体蛋白水平于第2周、第4周显著减少(P<0.05,P<0.01),第8周、第16周明显增加(P<0.01);血小板释放丛集蛋白水平第4周、第8周、16周显著升高(P<0.05,P<0.01);血小板释放Aβ含量第8周、16周增多(P<0.05);血小板培养液中纤维状Aβ形成比第2周、4周、8周、16周均显著上升(P<0.01)。给药尼莫地平后,与SAD组相比,SAD+尼莫地平组大鼠血小板内淀粉样前体蛋白水平明显减少(P<0.05)、血小板释放丛集蛋白水平和Aβ含量明显下降(P<0.01)、血小板培养液中纤维状Aβ形成比显著降低(P<0.01)。5.脑指标结果:与Sham组相比,SAD组海马区第8周、16周Aβ含量显著增加(P<0.05,P<0.01),皮层区Aβ第4周、8周、16周含量明显增多(P<0.05,P<0.01);SAD组脑血管内皮Aβ沉积比在第2周、4周、8周和16周均明显增加(P<0.01);给药尼莫地平后,与SAD组相比,尼莫地平组大鼠海马和皮层Aβ含量、脑血管内皮Aβ沉积比显著减少(P<0.01)。结论1.血压波动性增高能够导致大鼠学习记忆功能的减退,机制与促进血小板释放丛集蛋白和Aβ,导致纤维状Aβ沉积于脑血管内皮有关。2.尼莫地平可能改善血压波动性增高导致的学习记忆功能减退,机制与抑制血小板释放丛集蛋白和Aβ,减少纤维状Aβ沉积于脑血管内皮有关。