荔枝炭疽病菌对3种杀菌剂的抗药性研究

来源 :华南农业大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:wuyonghong1974
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荔枝炭疽病,由胶孢炭疽病菌(Colletotrichum gloeosporioides Penz.)引起,是荔枝的重要病害之一,对荔枝采前采后都可构成危害,严重制约着荔枝的生产。目前化学防治是防控荔枝炭疽病的主要方法。甲基硫菌灵、咪鲜胺及嘧菌酯已用于防治荔枝炭疽病多年,但目前仍未见抗药性的报道。本研究于2012年至2016年采集了来自福建、海南、江西、广东、广西、四川、云南7个不同省区的356个荔枝炭疽病菌菌株,分别测定了甲基硫菌灵、咪鲜胺和嘧菌酯对这些菌株的有效中浓度值(EC50);分别建立了荔枝炭疽病菌对甲基硫菌灵、咪鲜胺及嘧菌酯的敏感性基线;以敏感性基线为标准进一步评价荔枝炭疽病菌对药剂的抗性程度及发生情况。同时,也对抗性菌株(或突变体)的生物学特性、交互抗药性及抗性分子机制进行了研究。主要结果如下:采用菌丝生长速率法测定了甲基硫菌灵对351个荔枝炭疽病菌菌株的有效中浓度值(EC50),经分析确定荔枝炭疽病菌对甲基硫菌灵的敏感性基线为0.6433±0.2156μg/m L。以敏感性基线为标准,计算各菌株的抗性指数,结果表明:在供测定的351个菌株中,有202株敏感,1株低抗,9株中抗,139株高抗,抗性菌株的数量达149株,占到总群体的42.45%。生物学特性研究表明,抗性菌株的适应性与敏感菌株无显著性差异。交互抗药性研究的结果表明,甲基硫菌灵与噻菌灵、多菌灵有正交互抗性,与乙霉威有负交互抗性。分子机制的研究发现荔枝炭疽病菌对甲基硫菌灵的抗性主要是由于位于β-微管蛋白tub2基因上第198位氨基酸由谷氨酸突变为丙氨酸引起。采用菌丝生长速率法测定了咪鲜胺对356个荔枝炭疽病菌菌株的有效中浓度值(EC50),经分析确定荔枝炭疽病菌对咪鲜胺的敏感性基线为0.0573±0.0299μg/m L。以该基线为标准,计算各菌株的抗性指数,发现有1株高抗菌株。通过药剂驯化得到4株抗性突变体,发现抗药突变体的菌丝生长速率、菌丝干重、产孢量、孢子萌芽率和致病力等方面,均显著下降。未发现咪鲜胺与苯醚甲环唑、吡唑醚菌酯、咯菌腈、噻菌灵、百菌清、甲基硫菌灵、戊唑醇这几种药剂没有交互抗性。采用孢子萌芽法测定了嘧菌酯对174个荔枝炭疽病菌菌株的有效中浓度值(EC50),经分析确定荔枝炭疽病菌对嘧菌酯的敏感性基线为11.8871±33.4922μg/m L,以该敏感性基线为基准,计算各菌株的抗性指数,结果表明:174株荔枝炭疽病菌中,有163株敏感菌株,6株低抗菌株,4株中抗菌株和1株高抗菌株。抗性菌株的数量有11株,占到总群体的6.32%。抗性菌株的适应性及遗传稳定性与敏感菌株无显著性差异。交互抗药性研究结果表明嘧菌酯与吡唑醚菌酯有正交互抗性,而与其他杀菌剂没有交互抗性。本研究在荔枝炭疽病菌线粒体细胞色素c的氨基酸120-155位未发现单基因突变。
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