泛素-蛋白酶体途径(ubiquitin-proteasome，UPS)是真核生物体内的蛋白质降解途径，由泛素激活酶E1、泛素结合酶E2、泛素连接酶E3以及26S蛋白酶体复合物四个部分实现。植物泛素连接酶E3主要包括四种类型：细胞分裂后期复合体型、HECT型、SCF型和RING/U-box型。其中，植物U-box蛋白简称为PUB(plant U-boxprotein)。拟南芥中已报道至少存在64个PUB基因成员，有研究表明拟南芥PUBs(AtPUBs)家族成员在植物逆境响应中发挥重要功能，且不少家族成员之间存在功能互补或冗余的现象。AtPUB10是AtPUBs家族中的一员，通过介导bHLH家族MYC2转录因子的泛素化降解抑制茉莉酸途径、负调控脱落酸途径，然而缺乏pub10突变体对植物病原菌的响应，以及与AtPUB10高度同源的AtPUB11是否参与调控植物病原菌响应的研究。
　　为了分析拟南芥E3泛素连接酶PUB10、PUB11对植物病原菌响应的影响，我们首先对AtPUB10、AtPUB11进行生物信息学分析，分析它们之间的亲缘关系以及同源性。从前提构建的遗传学突变体材料中，鉴定拟南芥pub10/pub11双突变体，并从PstDC3000侵染、病原菌引起植物突变体MAPK的变化、flg22刺激拟南芥叶片ROS释放量以及定量免疫基因的表达水平等方面着手，探究AtPUB10、AtPUB11在抵抗PstDC3000的调控作用。获得如下结果和结论：
　　(1)通过生物信息学分析，发现构建的AtPUBs家族进化树AtPUB10、AtPUB11聚类在一起，两者蛋白氨基酸序列比对相似性达到75.44%，基因启动子都有多种光响应元件、激素响应元件以及防御和胁迫响应元件等，二级结构都主要由α-螺旋和无规卷曲构成，并且三级结构非常相似，说明两者有非常近的亲缘关系以及同源性，在拟南芥体内具有相似的生物学功能。
　　(2)采用三引物法及表达量验证等方法成功鉴定并获得pub10/pub11双突变体；构建AtPUB10基因分段表达的pGEX4t-1载体，表达、纯化了PUB10分段蛋白；通过GST-PUB10-ARM分段蛋白免疫小鼠获得PUB10抗体，为后续AtPUB10、AtPUB11的生化功能研究打下基础。
　　(3)通过植物抵抗病原菌的实验，发现pub10/pub11双突变体对PstDC3000更敏感，进一步分析AtPUB10、AtPUB11的缺失对植物免疫的影响，发现pub10/pub11双突变体在PstDC3000处理后MAPK磷酸化水平在10-20min间快速下降，flg22刺激后ROS释放量降低，且JA响应基因与免疫负调控基因表达量上升明显，说明AtPUB10、AtPUB11在抵抗PstDC3000具有正调控作用。
　　综上所述，本论文的研究结果表明AtPUB10、AtPUB11在拟南芥体内具有相似的生物学功能，能够利用大肠杆菌系统在体外分段表达，抵抗PstDC3000病原菌的过程具有正调控作用，并存在功能冗余。