【摘 要】
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结核分枝杆菌是一种严重危害人类健康的恶性传染病原微生物，它有极强的抗逆性和潜伏感染能力，结核的耐药突变问题是当前有效控制结核病蔓延的难点。本论文针对结核分枝杆菌的基
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结核分枝杆菌是一种严重危害人类健康的恶性传染病原微生物，它有极强的抗逆性和潜伏感染能力，结核的耐药突变问题是当前有效控制结核病蔓延的难点。本论文针对结核分枝杆菌的基因突变机制问题，筛选和发现新的调控基因并在模式分枝杆菌中系统考察了它们对基因表达和突变频率的影响，主要取得了以下几个方面的结果： （1）采用细菌单杂交技术，通过筛选结核分枝杆菌的转录因子文库，鉴定了Rv2745c能够结合 DNA修复相关基因启动子中普遍存在的一个高度保守的序列——RecA-NDp。（2）通过随机突变鉴定了Rv2745c中两个DNA结合必须的氨基酸残基，发现了RelA能够与Rv2745c相互作用并且调控它的DNA结合活性。（3）成功构建了耻垢分枝杆菌 mc2155中 Rv2745c同源基因敲除突变菌株，并且发现突变株与野生菌株相比细胞明显变长，基因突变频率显著下降。（4）染色体免疫共沉淀分析发现，耻垢分枝杆菌的Rv2745c同源蛋白在细菌体内能够结合保守的启动子序列模体。（5）定量PCR分析证实，在突变菌株中，这些含有保守启动子的修复相关基因表达量明显下调。 因此，我们的研究发现了一个可能在分枝杆菌中参与调控 DNA修复相关基因表达调控的新功能基因，这些结果对于理解结核分枝杆菌基因突变和耐药性产生的分子机制提供了重要信息，也为深入研究分枝杆菌中 DNA修复调控机制和信号途径奠定了基础。
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