论文部分内容阅读
茶籽经榨油后的饼粕中含有茶皂素、蛋白质、淀粉和糖类等物质。目前有关茶粕成分的研究主要集中在茶皂素,而对茶籽多糖的研究相对甚少,茶籽多糖作为一种重要的茶源提取物和活性多糖,具有一定的研究和应用价值。因此,本文在对茶粕主要营养成分分析的基础上,对茶粕多糖的提取、纯化工艺,结构鉴定以及体外抗氧化效果进行研究。主要结果如下：1.原料湿茶粕主要营养组成及含量分别为：水分为59.09%,灰分为0.74%,粗脂肪为6.80%,粗蛋白为7.61%,粗纤维为2.90%,总糖为9.84%。2.采用超声波辅助提取茶粕多糖,经单因素实验及正交实验优化得到的茶粕多糖最优提取工艺为：料液比1：15,超声功率150W,提取温度80℃,提取时间45min。在此优化工艺条件下,茶粕多糖得率约为14.22±0.51%。3.通过比较Sevage法、三氯乙酸法和木瓜蛋白酶-Sevage法,确定木瓜蛋白酶-Sevage法的脱蛋白效果最佳,对该法进行单因素实验和响应面优化,得到茶粕多糖的最佳脱蛋白工艺：酶用量78U/mL,酶解温度65℃,pH7.0,酶解时间92min,然后再结合3次Sevage法。在此最佳工艺条件下,得到的平均蛋白脱除率为80.52%,多糖保留率为84.29%。4.采用DEAE-Sephadex A-25对脱蛋白后的茶粕多糖进行分级纯化,得到TSP1、TSP2和TSP3三个多糖组分,其中TSP1和TSP2为中性多糖,TSP3为酸性多糖；采用Sephacryl S-200凝胶色谱法和HPLC法鉴定其纯度,结果表明TSP1和TSP2是杂多糖,而TSP3是均一多糖。经PMP-HPLC柱前衍生化分析,TSP1的单糖组成为葡萄糖、甘露糖及鼠李糖,摩尔比为6.29：1.00：0.15；TSP2的单糖组成为葡萄糖、甘露糖和半乳糖,摩尔比为3.13：1.00：0.03。TSP3的单糖组成为葡萄糖、甘露糖、半乳糖、阿拉伯糖、半乳糖醛酸和少量鼠李糖,摩尔比为0.42：1.00：1.09：0.96：0.43：0.19。红外光谱测定显示TSP1、TSP2和TSP3均具备多糖的特征吸收峰,且以α构型的吡喃糖为主。1H NMR表明,TSP3的组成单糖为α和β构型,其中阿拉伯糖,鼠李糖和半乳糖醛酸残基为α构型,半乳糖残基为p构型；13C NMR结果表明TSP3由六种单糖组成,并且含有糖醛酸,与HPLC鉴定结果一致。6.体外抗氧化实验表明,茶粕多糖清除·OH及DPPH·的能力与浓度呈正相关,当茶粕多糖浓度为5mg/mL时,对·OH及DPPH·的清除率分别达到84.6%和73.5%；但对超氧阴离子的清除能力较弱,并且几乎没有还原能力。