大花石蝴蝶（Petrocosmea grandiflora）是苦苣苔科（Gesneriaceae）石蝴蝶属（Petrocosmea）多年生草本植物,花朵硕大,花冠淡紫色或蓝紫色,具有较高的观赏价值。该种植物仅在云南省红河州分布,已列入《云南省极小种群野生植物保护名录（2021版）》。因此,对大花石蝴蝶进行生物学特性和无性繁殖技术研究对其有效保护和合理利用具有重要意义。本研究以大花石蝴蝶为试材,研究了大花石蝴蝶叶片解剖形态、花部形态、花粉形态及花粉活力和柱头可授性,优化了大花石蝴蝶染色体制片技术,并进行染色体核型分析;采用流式细胞术首次预测了大花石蝴蝶的基因组大小。此外,还探究了不同IBA浓度对大花石蝴蝶叶片扦插的影响,并筛选出组织培养不同外植体最佳消毒时间,为大花石蝴蝶无性繁殖技术体系的建立提供参考。研究结果主要有以下几个方面:（1）对大花石蝴蝶叶解剖形态、花部形态、花粉形态、花粉活力和柱头可授性等生物学特性进行了研究,结果表明:大花石蝴蝶上、下表皮细胞均由一层细胞组成,排列紧密,上表皮细胞轮廓为清晰、不规则的多边形,垂周壁平直,栅栏组织紧贴上表皮由1～2层不规则细胞组成,具有整齐清晰的层次;下表皮细胞轮廓为清晰的不规则形,垂周壁浅波状,海绵组织由2～3层圆形或不规则形的细胞组成,细胞大小不一,且细胞间有间隙。大花石蝴蝶气孔一般散生于叶下表皮,气孔器类型为平列型,下表皮气孔器大小为19.38×15.65μm,气孔密度45个/mm~2,气孔指数为50%。大花石蝴蝶花冠紫色或蓝紫色,为明显二唇形。上唇和下唇在基部有两小块暗紫色斑块。雄蕊2枚,着生于花冠筒基部,基部周围有黄色斑点,雌蕊1枚,子房密被短柔毛。其花粉为近长球形,极面观三裂近三角形。具三拟孔沟,萌发沟在赤道中部较宽,两端渐尖,极端不汇合,沟区表面具粗颗粒。外壁为疣状纹饰,表面有颗粒突起。大花石蝴蝶花粉在花蕾期已经具有一定活性,花粉活力为25.93%,始开期花粉活力最高,为65.87%;盛开期的花粉活力与始开期基本一致,为58.35%。而柱头可授性在盛开期最强,始开期次之,花蕾期柱头可授性表现最弱。（2）对大花石蝴蝶染色体核型和基因组大小进行分析,结果表明:根尖在冰水混合物24 h预处理和1 mol/L盐酸+45%乙酸1:1混合液解离3 min的条件中,能得到分散良好,形态清楚,便于观察的染色体。核型分析研究表明:大花石蝴蝶为二倍体,染色体数目为2n=34,核型公式为2n=2x=34m,相对长度系数为0.65～1.68,最长染色体与最短染色体长度比为2.79;臂比值为1.05～1.61,核型类型属于1B型,核型不对称系数为53.99%,其含有1条随体。基于流式细胞术,大花石蝴蝶基因组大小为1685.05 Mbp,1C DNA含量为1.72 pg。（3）大花石蝴蝶繁殖研究结果表明,与100 mg/L、200 mg/L和300 mg/L相比,0mg/L IBA处理叶片扦插成活率最高,子株数及子株叶片数最多、最长根长最长。以大花石蝴蝶叶片和种子为外植体,进行最佳消毒时间的筛选,结果表明:0.1%Hg Cl2消毒1.5 min对叶片表面消毒,其成活率最高,为33.3%;但外植体在后面的生长极为缓慢或停止生长,并未获得无菌苗。0.1%Na Cl O 30 s对种子表面消毒,污染率最低,萌发率较高,为最适合的消毒处理组合,且能够在40 d左右萌发,成功获得无菌苗。