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目的本课题拟通过对灵长类老年食蟹猴探讨II型糖尿病(Diabetes mellitus type 2, T2DM)对阿尔茨海默病(Alzheimer’s Disease,AD)发病发展的影响,运用ELISA、免疫组织化学方法来检测老年食蟹猴血浆、脑脊液(Cerebrospinal fluid,CSF)及脑组织中AD核心生物标记物的改变。方法1.应用血生化分析对老年食蟹猴根据空腹血糖(FPG≥2 7.0mmol/L)检测,进行动物筛选,并检测血糖类[糖化血红蛋白(glycosylated hemoglobin,HbA1c)、糖化血清蛋白(Glycosylated serum protein, GSP)]和血脂类[总胆固醇(Total cholesterol, TC)、高密度脂蛋白胆固醇(High-density lipoprotein cholesterol, HDL-c)、甘油三酯(Triglycerides, TG)、低密度脂蛋白胆固醇(Low-density lipoprotein cholesterol, LDL-c) ]。2.应用酶联免疫吸附试验(ELISA)技术对自发性T2DM老年食蟹猴和正常老年食蟹猴血浆中T2DM相关生物标记物(C-肽、INS、IRG)及AD相关核心生物标记物(Aβ42、Aβ40、tau、p-tau)进行定量分析,并分析其相关关系。3.采用ELISA检测技术对自发性T2DM老年食蟹猴和正常老年食蟹猴CSF中AD相关核心生物标记物(Aβ42、Aβ40、tau、p-tau)进行定量分析。4.经尸解获取脑组织,利用免疫组织化学法检测AD相关核心生物标记物的表达。5.最后,通过ELISA检测血浆、CSF中其他AD相关生物标记物(p-tau 199、p-tau231、p-tau396)的表达水平。结果根据 FPG 水平即 FPG ≥ 7.0 mmol /L 诊断为 T2DM, FPG < 5.6 mmol/L为正常,经血生化分析结果筛选老年食蟹猴(年龄> 18岁)为自发性T2DM食蟹猴(DM组)和正常食蟹猴(NC组)作为实验对象。检测DM组血浆中AD相关核心生物标记物水平低于NC组,Aβ42、tau、p-tau与正常组相比具有显著的统计学差异,且随FPG水平升高而降低,而Aβ40并无此变化。DM组血浆中T2DM相关生物标记物(C-肽、INS、IRG)水平均比NC组较高,但差异并无统计学意义,而DM组CSF中C-肽水平明显比NC组高,差异有统计学意义。DM组血浆中C-肽、INS与tau均呈线性关系,具有统计学意义,而正常组并无此现象。根据 2016 年 ADA 的诊断标准[11],即 FPG ≥ 7.0 mmol/L, HbA1c ≥ 6.5 %诊断为T2DM, FPG<5.6mmol/L,HbA1c<5.6 %为正常,筛选出符合ADA标准的T2DM猴(DM+组)和正常猴(NC+组)。DM+组CSF中AD相关核心生物标记物水平低于正常(NC+)组,Aβ40、Aβ42的减低具有显著差异。组织病理学观察到DM+组颞叶皮层Aβ沉积与NC+组相似,而DN+组p-tau则显示在胞浆中明显增多,相反,NC+组中并无明显变化。AD其他相关生物标记物(p-tau199、p-tau231、p-tau396)在CSF的表达水平显著高于血浆,尤其血浆中p-tau231、p-tau396未测出,可见血浆中AD的其他生物标记物水平较低。血浆中DM组与NC组AD相关生物标记物水平相差不大,CSF中DM组比NC组AD相关生物标记物水平较高,但无统计学意义。结论T2DM老年食蟹猴血浆、CSF中AD相关核心生物标记物水平显著降低,并形成AD相关的病理变化。进一步表明T2DM可潜在加速AD发病发展,自发性T2DM老年食蟹猴可作为AD基础和转化研究的较好的预测模型。