草莓(Fragaria ananassa Duch)属蔷薇科草莓属多年生草本植物，是世界上广泛栽培的重要经济果树，然而草莓不能安全越冬和耐寒品种的缺乏成为生产上的突出问题。由于草莓的栽培品种多为八倍体，遗传性状高度杂合，给常规杂交育种带来很大困难。现代基因工程直接在基因水平上改良，打破了物种间的界限，在培育抗病、抗虫、抗逆境和抗除草剂等草莓优良品种中发挥越来越重要的作用。水稻转录因子RdreB1BI是一个调控植物发育且与植物胁迫抗性相关的转录因子。已有研究证明将RdreB1BI基因转化拟南芥，拟南芥植株的抗旱性和耐寒性有很大提高。本研究的目的是用根癌农杆菌介导法将逆境诱导型启动子rd29A诱导RdreB1BI基因转化草莓品种‘红颊’，获得抗寒性较强的转基因植株，以培育抗寒草莓新种质。主要研究结果如下：　　 1.以草莓‘明宝(Meiho)’和‘红颊(Benihope)’两个品种的叶片为外植体，研究了不同基本培养基、暗培养时间、植物生长调节剂、叶龄、放置方式对其不定芽再生的影响。结果表明：各品种叶片不定芽离体再生的最佳条件不同。‘明宝’叶片的最佳不定芽再生培养基为MS+2.5mg/L TDZ+0.1mg/LIBA+0.1mg/L2，4-D，叶片再生的最佳叶龄为30～40d，再生率可达82.8％；‘红颊’叶片的最佳不定芽再生培养基为MS+2.0mg/L TDZ+0.1mg/L IBA+0.1mg/L2，4-D，叶片再生的最佳叶龄在10～20d，再生率可达80％。两个品种叶片暗培养14d可以提高不定芽再生率；叶片正放比反放再生效果好；添加浓度8mg/L AgNO3和1000 mg/L活性炭可有效提高再生率。　　 2.以‘红颊’草莓品种的叶片为受体，对影响遗传转化的一系列因子(潮霉素选择压、抗生素种类和浓度、农杆菌浓度、浸染时间和共培养时间)进行优化，建立了高效的遗传转化体系。优化的转化体系为：菌液浓度为OD600=0.4；侵染时间为6min；250mg/L的Cb作为抑菌抗生素，5mg/L的潮霉素作为筛选抗生素；共培养时间3天。　　 3.为培育耐低温的草莓新种质，我们将诱导型启动子rd29A诱导RdreB1BI基因转入草莓优良品种‘红颊’中。将5株转基因植株进行分子检测，GUS染色成阳性、PCR结果显示RdreB1BI基因已成功整合到5株转基因植株的基因组中；RT-PCR检测结果显示RdreB1BL基因已在这5个转基因株系中进行了转录；将转基因植株进行炼苗盆载以及利用Inverse PCR方法对其进行目的基因拷贝数检测，结果显示拷贝数1～3个不等。　　 4.将通过GUS染色、PCR、RT-PCR和目的基因拷贝数检测的五个转基因株系进行低温处理，选出最抗寒株系检测丙二醛(MDA)、脯氨酸、可溶性蛋白、可溶性糖含量和超氧化物岐化酶(SOD)、过氧化物酶(POD)、过氧化氢酶(CAT)的活性，结果表明，其中一个单拷贝的株系的转基因植株可以忍受-4℃低温并可以恢复正常生长，RdreB1BI基因在0℃时表达量最高。进一步研究发现导入RdreB1BI转录因子可显著减弱MDA在植物体内的积累，提高可溶性蛋白、游离脯氨酸的含量、SOD以及CAT的活性，从而提高了转基因草莓的抗寒能力。