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1临床研究1.1目的研究重度、极重度慢性阻塞性肺疾病患者中医证候分布特点1.2方法查询文献,结合导师诊病经验,参考《中医诊断学》辨证论治、四诊合参相关内容,并联系《中医内科学》相关知识,设计问卷调查并制定COPD重度、极重度患者中医证候调查表。1.3结果120例重度和极重度COPD患者中,前3位证型为肺肾气虚证(31.7%)、痰浊阻肺证(23.4%)、痰热郁肺证(20.8%)。1.4结论COPD重度、极重度证型多表现为肺肾气虚夹瘀证,虚实夹杂。2实验研究2.1目的通过研究参七化痰方含药血清对ASMCs中相关Rho Am RNA、ROCKI/IIm RNA、MYPT-1 m RNA表达的影响,探讨COPD气道重塑与Rhoa/ROCK信号通路的预防和治疗之间的相关性,为临床治疗COPD提供充分的科学和理论依据。2.2方法首先制备参七化痰方血清和空白对照血清;然后,分离和培养气道平滑肌细胞(ASMCs);最后选择生长良好的ASMCs,用DMEM液过夜,使细胞生长统一至G0期,随机分为6组:空白组,模型组(20%空白血清),阻断剂法舒地尔(Fasudi)(3mmol/L),阻断剂法舒地尔(Fasudi)(3mmol/L)+SQHTF组含药血清5%、10%、20%三组。每组设三个平行孔。24小时后,向除空白之外的各组中加入TNF-a(10ng/m L),并将待测指标进一步培养24小时。用RT-q PCR法检测各组ASMCs Rho Am RNA、ROCKI/IIm RNA、MYPT-1m RNA表达水平。2.3结果2.3.1与空白对照组比较,其余各组气道平滑肌细胞中Rho Am RNA、RockⅠm RNA、RockⅡm RNA、MYPT-1 m RNA表达均显著高于正常组,差异有统计学意(P<0.001);2.3.2与模型组比较,各治疗组大鼠气道平滑肌细胞中Rho Am RNA、RockⅠm RNA、RockⅡm RNA、MYPT-1 m RNA表达均降低,其中RockⅠm RNA(P>0.05)不具有统计学意义,余各组(P<0.001),具有统计学意义;2.3.3与Fasudil组相比,SQHTF+Fasudil各组中气道平滑肌细胞中Rho Am RNA、RockⅠm RNA、RockⅡm RNA、MYPT-1 m RNA表达均降低,差异有统计学意义(P<0.05或P<0.01或P<0.001);2.3.4各SQHTF+Fasudil组之间相互比较,10%及20%SQHTF+Fasudil组大鼠气道平滑肌细胞Rho Am RNA、RockⅠm RNA、RockⅡm RNA、MYPT-1 m RNA表达降低最显著,差异有统计学意(P<0.001);与10%SQHTF+Fasudil组相比,20%SQHTF+Fasudil组大鼠气道平滑肌细胞Rho Am RNA、RockⅠm RNA、RockⅡm RNA、MYPT-1 m RNA表达降低,但不显著,(P>0.05)不具有统计学意义。2.4结论SQHTF含药血清对ASMCs中Rho Am RNA、ROCKI/IIm RNA、MYPT-1m RNA表达均降低,抑制气道炎症和参与气道重塑,为COPD的未来治疗提供了新的思路。