FⅩⅢ是一种转谷氨酰胺酶,交联催化纤维蛋白链的谷氨酰胺和赖氨酸残基,以稳定纤维蛋白,使得纤维蛋白凝块更加具有强度和稳定性。FⅩⅢ活性测定方法主要有凝块溶解法、氨释放法、胺结合法、酶联免疫法、荧光标记法等方法。本研究旨在通过采用两种FⅩⅢ凝块溶解法与氨释放法对比研究,确定冻干纤维蛋白原FⅩⅢ合适的检验方法。对冻干猪标准血浆和缺FⅩⅢ纤维蛋白原进行相关研究,降低日常检验成本和确保检验质量。全文分六章,主要内容如下:第一章介绍研究背景。首先介绍FⅩⅢ的结构和功能,其次总结国内纤维蛋白粘合剂的生产情况,最后对FⅩⅢ测定方法归纳总结。第二章对冻干猪标准血浆的工艺和质量标准研究。确定甘露醇和HEPES为冻干保护剂。对冻干猪标准血浆进行质量评价和效价标定,质量标准项目:复溶时间、无菌检查、水分、分装精确度、含量均匀度,3批冻干猪标准血浆均符合质量标准,FⅩⅢ定值分别为100.29%、100.37%、100.88%。第三章建立缺FⅩⅢ纤维蛋白原质量指标:外观性状检查、凝块溶解性检查、纤维蛋白原含量测定。凝块溶解性检查检测限在0.5-1.0%。选用Clauss法测定缺FⅩⅢ纤维蛋白原的含量,线性范围104-624mg/L内,浓度和凝固时间的双对数回归呈线性(r=0.9988);重复性、中间精密度、准确度均良好。第四章确定改良凝块法用于猪冻干纤维蛋白原FⅩⅢ效价测定,进行方法验证。方法学验证结果表明该测定能有效的控制产品质量:专属性、精密度、重复性、溶液稳定性良好。确定含0.4%人血白蛋白的生理盐水溶液为样品稀释溶液可以使溶液中FⅩⅢ分布均匀;考察凝血酶溶液效价的准确性对测定结果的影响;对不同来源冻干纤维蛋白原FⅩⅢ测定比较研究,改良凝块溶解法测定值更加接近于真实活性。第五章对血浆FⅩⅢ测定进行对比研究。研究结果表明:氨释放法和改良凝块溶解法测定人血浆FⅩⅢ活性分别为0.998±0.189 vs 1.086±0.462(P=0.221),无显著性差异;氨释放定量法和改良凝块溶解法测定猪血浆FⅩⅢ活性分别为0.955±0.194 vs 1.043±0.443(P=0.115),无显著性差异。人、猪血浆FⅩⅢ活性值无显著性差异(P=0.355)。改良凝块溶解法与氨释放法测定结果相近似。第六章对全文进行总结与展望。