背景：骨髓间充质干细胞(Mesenchymal stem cells，MSCs)是存在于骨髓中的多能干细胞，由于其来源方便、扩增相对容易、自体移植不存在免疫排斥反应，且不存在胚胎干细胞、神经干细胞有可能涉及到的伦理道德问题，因此成为较理想的细胞治疗、基因治疗及组织再生的工具，在临床应用上受到越来越广泛的关注。目前已用于联合造血干细胞进行异基因骨髓移植、纠正某些先天性疾病(如先天性成骨发育不全)、治疗脑血管病和神经变性病以及心血管疾病等。由于MSCs在骨髓中存在的数量少，又缺少特异性表面标记，因此在临床应用前必须进行扩增。但长期培养过程使MSCs的增殖能力减弱，细胞变平、增宽，呈现老化征象，使其应用受到一定的限制。因此寻找影响MSCs增殖能力的相对特异基因并探讨其作用机制，将为转基因修饰MSCs以维持细胞的增殖、尽可能避免肿瘤发生发挥重要作用。 干细胞的增殖受到外部信号及内在遗传机制的调节。目前对外部信号研究较多，(如Notch、Wnt等信号通路调节造血干细胞、神经干细胞的自我更新)，而对内在遗传机制了解相对较少，Bmi-1基因是其中一个为数不多的已知的干细胞内在调节基因，它是Polycomb group家族成员，是维持神经干细胞、造血干细胞、肿瘤干细胞自我更新及小脑颗粒神经元祖细胞增殖所必须的，通过部分抑制衰老相关基因来实现其调节功能。它的缺失会引起神经系统、造血系统异常，脑组织发育迟滞，神经干细胞的克隆形成率明显下降，造血干细胞池明显减少，表现出自我更新能力的降低。 方法：利用贴壁培养法，分别从5个非造血系统疾病患者的髂后上棘抽取骨髓并分离培养出hMSCs,并进行扩增，流式细胞仪检测细胞表型，绘制hMSCs的生长曲线，取第三代和第九代hMSCs为研究对象，进行SA-β-gal染色，比较老化指标SA-β-gal的变化，通过抽提各代次细胞的RNA，逆转录PCR定量Bmi-1基因量的变化，分析与细胞倍增代数的关系。 结果：我们利用长期培养的hMSCs，比较第一代、第三代、第六代、第九代、第十二代、第十五代细胞Bmi-1的表达情况，RT-PCR的结果显示培养的hMSCs随着传代次数的增加Bmi-1基因表达下降。因此推测，Bmi-1基因的表达与hMSCs的增殖有关。