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【目的】筛选石斛抗糖性白内障的有效成分,阐明其作用机制,为开发抗糖性白内障的石斛制剂奠定基础。【方法】1.提取金钗石斛总生物碱和多糖,采用H2O2制备wistar大鼠离体晶状体混浊模型,将大鼠晶状体随机分为7组:正常对照组（DMEM培养基+10%胎牛血清+1%青霉素和链霉素溶液）,模型对照组（正常对照组培养基+2mmol/L30%H2O2）,阳性对照组（模型组培养基+10%吡诺克辛钠滴眼液）,总生物碱高、低剂量组（模型组培养基+4mg/mL或2mg/mL总生物碱）,多糖高、低剂量组（模型组培养基+4mg/mL或2mg/mL多糖）,5%CO2,37.0℃孵育。在培养后的第6、12、18、24 h分别用解剖显微镜观察并记录晶状体混浊度,石蜡切片HE染色观察晶状体组织的形态学改变,并测定晶状体水溶性蛋白、GSH、MDA含量和T-SOD活性。2.4～5周龄wistar大鼠,予以腹腔注射D-半乳糖制备糖性白内障模型,随机分为7组:正常对照组（常规饲养）,模型对照组（灌服生理盐水）,阳性对照组（灌服0.22g/kg/d石斛夜光丸）,金钗石斛总生物碱高、低剂量组（分别灌胃总生物碱0.36g/kg/d、0.18g/kg/d）,金钗石斛多糖高、低剂量组（分别灌胃多糖0.94g/kg/d、0.47g/kg/d）。连续灌胃42天,每隔7天采用裂隙灯显微镜观察大鼠晶状体浑浊度。灌胃结束后,抽提晶状体全蛋白,用二维凝胶电泳、图像分析、质谱鉴定等蛋白质组学技术筛选石斛抗D-半乳糖性白内障的差异表达蛋白质,并分析找出其靶标蛋白。【结果】1.金钗石斛总生物碱和多糖均可延缓晶状体的混浊时间,并可明显减轻晶状体的混浊度,明显减轻晶状体上皮细胞形态、组织结构及晶状体纤维的病理损伤,而且可明显升高晶状体水溶性蛋白、GSH含量以及T-SOD活性,降低MDA含量（P＜0.05或P＜0.01）,其中生物碱高剂量组水溶性蛋白含量明显高于阳性对照组（P＜0.05）,其MDA含量则明显低于阳性对照组（P＜0.05）,生物碱高剂量组和多糖高剂量组T-SOD活性与阳性对照组比较无差异（P＞0.05）。2.金钗石斛总生物碱可明显减轻大鼠晶状体混浊度。通过差异蛋白分析、质谱鉴定及生物信息学分析发现,βA3、βB3、γB晶状体蛋白,以及肌动蛋白、泛素羧基末端水解酶同工酶L1在D-半乳糖性白内障大鼠晶状体中含量明显下降,在总生物碱组大鼠晶状体中的含量则上升;αB、βA2、βB1、γN晶状体蛋白,在半乳糖性白内障大鼠晶状体中含量明显升高,而在总生物碱组晶状体中的含量则明显下降,以上蛋白质及酶含量的改变均为2倍以上,且具有99%统计学显著性意义。【结论】石斛抗糖性白内障的有效成分为总生物碱;其药靶蛋白可能为βA3、βB3、γB晶状体蛋白、肌动蛋白以及泛素羧基末端水解酶同工酶L1,其关键靶蛋白是肌动蛋白。