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研究目的间充质干细胞(Mesenchymal Stem Cells,MSCs)具有分化为成骨细胞和脂肪细胞的潜能,根据中医“肾主骨生髓”的理论基础,从细胞生物学方面研究补肾益气法对老化间充质干细胞活性和功能的影响;通过检测相关指标观察补肾益气法的抗衰老效果,为进一步研究补肾益气法治疗骨质疏松症提供依据。研究方法采用直接贴壁法分离3、7、12、56W四组不同周龄大鼠股骨和胫骨的MSCs,以地塞米松、β-磷酸甘油和抗坏血酸为诱导为成骨细胞,碱性磷酸酶、骨矿化结节染色作为成骨细胞鉴定的指标;以地塞米松、3-异丁基-1-甲基黄嘌呤、胰岛素、消炎痛诱导为脂肪细胞,油红-0染色,观察脂质泡颜色作为脂肪细胞鉴定的指标,证明MSCs有分化为成骨细胞和脂肪细胞的潜能。健康SD大鼠24只,雌雄各半,随机分为4组:健骨二仙丸组、六味地黄丸组、金匮肾气丸组、空白对照组,按16.0g生药/kg体重每天分2次灌胃,空白对照组予等量生理盐水灌胃,第三天末次灌药后60min、90min、120min,10%水合氯醛腹腔注射麻醉(0.3ml/100g),每次2只,在严格无菌条件下由腹主动脉取血。将各组血液于低温条件(4℃)下放置4h,离心(3000r/min)5min后取上清液,混合,56℃灭活30min,0.22um一次性滤器过滤除菌,分装,-20℃短期保存备用。将不同周龄大鼠MSCs分为四组:健骨二仙丸组、六味地黄丸组、金匮肾气丸组、空白对照组,中药组加入相应含药血清、空白组加入空白血清培养,48h后检测MSCs内超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)的活性。研究结果随着周龄增长,MSCs内SOD、GSH-Px活性明显下降,与年龄呈负相关性;用含补肾中药的血清培养后,MSCs内SOD、GSH-Px的活性明显提高,与空白对照组对照有统计学意义(P＜0.05),健骨二仙丸组与金匮肾气丸、六味地黄丸组对照无统计学意义(P＞0.05)。结论随着周龄增长,MSCs内SOD、GSH-Px活性明显下降,与年龄呈负相关性;补肾益气法能显著提高衰老MSCs细胞的活性,证实补肾益气法是抗骨质疏松的有效方法,为进一步研究补肾益气法治疗骨质疏松症提供依据。