论文部分内容阅读
目的：探讨人脐带血间充质干细胞的体外培养方法、细胞生长曲线、细胞表面标志等特性,分析脐带血作为间充质干细胞来源的可行性。方法：采集脐带血,Percoll分离液法分离脐血间充质干细胞,贴壁培养人脐血间充质干细胞并传代,绘制生长曲线,流式细胞仪鉴定脐血间充质干细胞表面标志物,所得数据通过统计软件SPSS18.0统计分析。结果：用贴壁培养人法可以从人脐带血中成功分离、培养出MSCS,经过反复换液及传代培养之后可以获得纯度较高的MSCS;人脐血间充质干细胞的生长曲线近“S”形,在传代后第1d细胞数有所减少,再经过几天的滞留期,然后进入对数生长期,其中,第3代细胞生长增殖最为旺盛,随着传代次数的增加能力有所下降；流式细胞仪检测人脐血间充质干细胞表面标志物显不CD90、CD44、CD34的表达率符合人脐血间充质干细胞的特点。结论：脐带血作为间充质干细胞来源具有可行性。目的：探讨如何建立人肝癌转移瘤模型。方法：进行MHCC97-H高转移人肝癌癌珠的培养及传代,并绘制其生长曲线,制备MHCC97-H细胞悬液,注射在裸鼠的背部皮下,观察裸鼠成瘤情况及转移情况,所得数据通过统计软件SPSS18.0统计分析。结果：MHCC97-H肝癌细胞培养成功,生长良好,有利于人肝癌转移瘤模型建立；通过绘制MHCC97-H肝癌细胞的生长曲线观察得出,MHCC97-H肝癌细胞的生长曲线近“S”形；对照组裸鼠成瘤时间短,成瘤直径长,成瘤率为100%；裸鼠皮下种植肿瘤呈逐渐增长趋势(P<0.05),实验组同对照组相比经统计学处理,有显著性差异,最早出现肝脏转移瘤时间为第4周,最早出现肺转移瘤时间为第5周。结论：人肝癌转移瘤模型造模成功。目的：探讨输注人脐血间充质干细胞对肝癌生长转移的抑制作用。方法：制作人脐血间充质干细胞细胞悬液,输注人脐血间充质干细胞于人肝癌转移瘤模型裸鼠,观察对比裸鼠成瘤情况及转移情况,流式细胞仪鉴定人肝癌转移瘤裸鼠模型血CD133+肝癌干细胞,所得数据通过统计软件SPSS18.0统计分析。结果：裸鼠实验组成瘤时间长于对照组P<0.05,而成瘤直径与对照组相比无统计学意义P>0.05；通过观察裸鼠皮下种植肿瘤呈逐渐增长趋势,最早出现肝脏转移瘤时间为第4周,最早出现肺转移瘤时间为第6周,晚于对照组,与对照组相比第三周肿瘤直径相比无统计学意义,肝转移率和肺转移率也相同,而第四、五、六周的皮下肿瘤直径均小于对照组P<0.05;随着肿瘤的生长与转移无论是实验组还是对照组血中CD133+肝癌干细胞的比率逐渐升高,差异有统计学意义(P<0.05)。对照组各周血中CD133+肝癌干细胞表达率高于试验组,差异有统计学意义(P<0.05)结论：输注人脐血间充质干细胞对肝癌生长转移有抑制作用,其机制可能与抑制了CD133+的肝癌干细胞有关。