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目的：检测山东省健康人群及HIV抗体阳性感染者T淋巴细胞亚群,初步建立山东省健康人群T淋巴细胞亚群的正常参考值范围,比较分析不同年龄、性别及传播途径的HIV抗体阳性感染者初诊时T淋巴细胞亚群变化,研究HIV感染过程中机体免疫的变化规律,为判断HIV感染后病情进展、残存免疫系统的功能状态、评估抗逆转录病毒治疗疗效以及免疫系统的康复等方面提供实验依据。方法：以山东省某医院健康体检及无偿献血人员为健康人群调查对象,以山东省2004-2009年确证的HIV抗体阳性者为HIV抗体阳性感染者调查对象,通过问卷调查和网络直报获取调查对象基本信息、感染者随访资料及实验室资料。严格按照无菌操作和生物安全的要求采集静脉全血5ml,EDTAK3防凝,室温下保存和运送样品,并于12小时内使用美国BD公司MultiTEST三色CD4FITC/CD8 PE/CD3 PerCP试剂、TruCount绝对计数管、FACS溶血素及FACS Calibur流式细胞仪进行T淋巴细胞亚群的检测,分析正常人群及HIV抗体阳性感染者人群的CD3+T淋巴细胞、CD4+T淋巴细胞、CD8+T淋巴细胞的细胞数及细胞百分率,并计算CD4+/CD8+比值。每次实验均加入标准质控品以确保实验的准确性与结果的可信性。分别将正常人群及HIV抗体阳性感染者人群按年龄、性别及传播途径进行分组,采用SPSS13.0统计分析软件对随访资料和实验室检测结果进行分析处理与比较。结果：1.建立山东省健康人群T淋巴细胞亚群的正常参考值范围：1.1山东省不同年龄健康人群T淋巴细胞亚群比较山东省不同年龄组间CD3+、CD3+CD4+细胞数体有显著性差异(F=3.246、2.763,P<0.05),不同年龄组CD3+、CD3+CD4+、CD3+CD8+百分比及CD3+CD8+:细胞数和CD4+/CD8+无显著性差异(F=0.453、1.892、0.385、2.197、1.892,P>0.05)。1.2不同性别山东健康人群T淋巴细胞亚群比较女性CD3+与CD3+CD4+细胞数显著高于男性(t=2.592、2.767,P<0.01)；不同性别间CD3+、CD3+CD4+百分比、CD3+CD8+的细胞数与百分比及CD4+/CD8+无显著性差异(t=1.823、1.682、0.676、1.380、0.107,P>0.05)。1.3不同年龄组内不同性别人群T淋巴细胞亚群比较20-29岁组CD3+细胞数、百分比,CD3+CD4+细胞数、百分比,CD3+CD8+细胞数及30～39岁组CD3+CD8+百分比性别间的差异有统计学意义(t=2.107、8.799、2.197、7.839、4.431、2.400,P<0.05),均为女性高于男性,但差别细微。其余各组差异无统计学意义。1.4山东省健康人群T淋巴细胞亚群95%参考值范围尽管个别项目存在差异,但差别细微,故可合并性别、年龄,以百分位数法建立山东省健康成人外周血T淋巴细胞亚群95%参考值范围：CD3+百分含量(%)：47.05-82.00；CD3+细胞数(个／u 1)：800.08-2189.73；CD3+CD4+百分含量(%)：24.03～51.98；CD3+CD4+细胞数(个／μ1)：433-1179.80；CD3+CD8+百分含量(%)：14.00-44.00；CD3+CD8+:细胞数(个／μ1)：246.10-1098.98；CD3+CD4+/CD3+CD8+: 0.72～3.06。1.5山东省健康人群T淋巴细胞亚群95%参考值范围与其它地区、民族及国家健康人群的T淋巴细胞检测结果比较相同仪器、相同染色方法及设门方式,研究对象例数越多,各项指标的参考值范围越接近。南北方汉族T淋巴细胞亚群各项参考值范围波动不大,与新加坡文献报道范围接近。汉族人群CD3+、CD3+CD4+、CD3+CD8+的细胞数均略高于南方彝族、傣族、壮族人群,而百分比略低于新疆维吾尔族人群。BD公司试剂盒给出的参考值范围更接近欧美人群的检测结果,且CD3+百分比及细胞数、CD3+CD4+百分比及细胞数均高于其他14个地区与民族,而CD3+CD8+百分比及细胞数差异不显著。2.山东省HIV抗体阳性感染者各T淋巴细胞亚群比较：2.1山东省HIV抗体阳性感染者各T淋巴细胞亚群结果检测结果显示,1271例HIV抗体阳性感染者CD3+T淋巴细胞数的均值为1592.856个／μL,CD4+T淋巴细胞百分含量的均值为17.545%,CD4+T淋巴细胞数的均值为389.107个／μL,CD8+T淋巴细胞百分含量为55.094%,CD8+T淋巴细胞数均值为1102.533个／μL,CD4/CD8比值的均值为0.382。HIV抗体阳性感染者的CD3+T淋巴细胞数、CD8+T淋巴细胞数和百分比均高于正常人,而CD4+T淋巴细胞数、百分比及CD4/CD8比值均低于正常人。2.2山东省HIV抗体阳性感染者感染途径分析此次调查的人群,≤19岁年龄组中,0-8岁感染者感染途径以母婴传播为主,20-29岁年龄组感染途径中,虽以异性传播为主,但同性传播比例明显高于其他年龄组。静脉吸毒人群中以少数民族居多,均为外省籍感染者迁入我省。其中配偶间传播途径感染的患者,其配偶大多为外来妇女或外来妇女前夫为HIV抗体阳性感染者。30-39岁年龄组以异性传播为主,配偶间传播比例明显高于其他各年龄段。40～49岁年龄组以异性传播途径为主,其中采血(浆)途径感染者较多,均为90年代初通过中原地区有偿献血途径感染者；配偶间传播途径感染者多为通过采血(浆)途径感染者的配偶。40～49岁年龄组中汉族占多数。50-59岁年龄组以采血(浆)途径为主,配偶间传播途径感染者多为通过采血(浆)途径感染者的配偶。50-59岁年龄组中汉族占多数。≥60岁年龄组感染者均为汉族。感染者以采血(浆)途径为主。2.3山东省HIV抗体阳性感染者不同传播途径组T淋巴细胞亚群比较不同传播途径组HIV抗体阳性感染者CD3+T、CD4+T及CD8+T淋巴细胞数血液途径与性传播途径及母婴途径存在统计学差异(均为P<0.01),性途径与母婴途径存在统计学差异(均为P<0.01)；母婴途径与传播途径不详有统计学差异(均为P<0.01)。通过均数比较发现母婴传播途径的CD3+T、CD4+T、CD8+T淋巴细胞数明显高于其他传播途径。不同传播途径组HIV抗体阳性感染者的CD4+T、CD8+T淋巴细胞百分比及CD4+/CD8+比值无统计学差异。进一步将血液传播途径细分为采血(浆)、静脉吸毒及输血／血制品传播,性传播细分为配偶间传播、同性传播、异性传播后分析发现,血液传播途径中,静脉吸毒途径与输血／血制品途径之间的CD3+T、CD4+T、CD8+T淋巴细胞数存在显著差异(均为P<0.01)；性传播途径中,配偶间传播与同性传播途径之间的CD3+T、CD8+T淋巴细胞数存在显著性差异(均为P<0.01)。2.4山东省不同民族HIV抗体阳性感染者T淋巴细胞亚群比较汉族与少数民族HIV抗体阳性感染者T淋巴细胞亚群各项总体比较无显著性差异。经血液传播途径感染的汉族与少数民族HIV抗体阳性感染者的CD3+T淋巴细胞数、CD4+T淋巴细胞数及百分比、及CD8+T淋巴细胞数之间均存在显著性差异(均为P<0.05),且少数民族HIV抗体阳性感染者的上述各项均值均高于汉族HIV抗体阳性感染者的同项目均值。传播途径不详的汉族与少数民族HIV抗体阳性感染者的CD3+T、CD4+T及CD8+T淋巴细胞数之间均存在显著性差异(均为P<0.05),且少数民族HIV抗体阳性感染者的上述各项均值均高于汉族HIV抗体阳性感染者的同项目均值。经性传播途径感染的汉族与少数民族HIV抗体阳性感染者的CD8+T淋巴细胞百分比之间有统计学意义(P=0.012)2.5山东省不同年龄组HIV抗体阳性感染者T淋巴细胞亚群比较≤19岁年龄组与其他各组的CD3+T、CD4+T、CD8+T淋巴细胞数均存在显著性差异(均为P<0.01),且≤19岁年龄组的同项目均数都高于其他各年龄组。CD3+T淋巴细胞数20-29岁年龄组与30-39岁年龄组、40-49岁年龄组、50-59岁年龄组均存在显著性差异(均为P<0.01)。且30-39岁年龄组与40-49岁年龄组CD3+T淋巴细胞数存在显著性差异(P=0.001)CD4+T淋巴细胞百分比仅20-29岁年龄组与50-59岁年龄组间存在显著性差异(P=0.041),均数比较50-59岁年龄组低于其他各年龄组。CD4+T淋巴细胞数20-29岁年龄组与40-49岁年龄组和50-59岁年龄组均存在显著性差异(均为P<0.01)；30-39岁年龄组与40-49岁年龄组存在显著性差异(P=0.004)。CD8+T淋巴细胞百分比≤19岁年龄组与20～29岁、30-39岁、40～49岁、50-59岁年龄组均存在显著性差异(均为P<0.05)均数比较发现,CD8+T淋巴细胞百分比≤19岁年龄组低于其他各年龄组。CD8+T淋巴细胞数20～29岁年龄组与30-39岁、40-49岁年龄组间存在显著性差异(均为P<0.05)。各年龄组CD4+/CD8+比值均无显著性差异(均为P>0.05)。均数比较CD4+/CD8+比值≤19岁年龄组高于其他各年龄组。2.6山东省不同性别HI、V抗体阳性感染者T淋巴细胞亚群比较男性感染者CD3+T、CD4+T、CD8+T淋巴细胞数及CD8+百分含量均高于女性感染者；CD4+百分含量和CD4+/CD8+性别间差异无统计学意义。3.HIV抗体阳性感染者与正常人群T淋巴细胞亚群比较HIV抗体阳性感染者的CD3+T、CD8+T淋巴细胞数和CD8+T淋巴细胞百分比均高于正常人,CD4+T淋巴细胞数、百分比及CD4/CD8比值均低于正常人。分年龄段比较HIV抗体阳性感染者与正常人群的T淋巴细胞亚群检测结果发现,≤19岁年龄组、20～29岁年龄组、30-39岁年龄组和50-59岁年龄组感染者的CD3+T淋巴细胞数、CD8+T及CD8+T淋巴细胞百分比均值高于同年龄组正常人群,CD4+T淋巴细胞数、百分比和CD4/CD8比值的均值低于同年龄组正常人群。40-49岁年龄组感染者的CD8+T淋巴细胞数、百分比均值高于正常人群,CD3+T、CD4+T淋巴细胞数、CD4+T淋巴细胞百分比和CD4/CD8比值的均值低于正常人群。比较同性别HIV抗体阳性感染者与正常人群T淋巴细胞亚群,结果发现：同性别HIV抗体阳性感染者的CD8+T淋巴细胞数、百分含量高于正常人群,而CD4+T淋巴细胞数、百分含量和CD4+/CD8+比值则低于正常人群。结论：1、根据检测的健康人群T淋巴细胞亚群结果,合并性别、年龄,以百分位数法初步建立山东省健康成人外周血T淋巴细胞亚群95%参考值范围,并与不同地区、不同民族及不同国家健康人群T淋巴细胞亚群检测结果进行比较,证明健康人群T淋巴细胞亚群在不同地区、民族间有一定差异,本正常参考值的建立为研究山东省人群免疫指标及深入分析山东省HIV抗体阳性感染者免疫状态提供了基本数据。2、获得了近年来山东省HIV抗体阳性感染者T淋巴细胞亚群指标,分析发现,不同感染途径、不同年龄及民族和性别均可影响HIV抗体阳性感染者不同T淋巴细胞亚群。3、分析比较了山东省HIV抗体阳性感染者与健康人群T淋巴细胞亚群的差异,证明随着病情发展,无论HIV抗体阳性感染者有无症状,HIV对T淋巴细胞亚群的侵犯是始终存在的,且与年龄、性别有关。进一步说明定期检测T淋巴细胞亚群是HIV感染后评判疾病进展的最好方式。