目的:本研究采用超高效液相色谱-串联质谱法(Ultra performance liquid chromatography-tandem mass spectrometry,UPLC-MS/MS)测定人体尿液中DNA/RNA甲基化、羟甲基化修饰产物5-甲基-2’-脱氧胞苷(5-methyl-2’-deoxycytidine,5-mdC)、5-羟甲基-2’-脱氧胞苷(5-hydroxymethyl-2’-deoxycytidine,5-hmdC)、5-甲基胞苷(5-methylcytidine,5-mrC)和5-羟甲基胞苷(5-hydroxymethylcytidine,5-hmrC)以及RNA氧化修饰产物8-羟基鸟苷(8-hydroxyguanosine,8-OHG)的含量,探索其与结直肠癌(colorectal cancer,CRC)的相关性,以求寻找到一种新的早期诊断结直肠癌的无创性生物标志物。方法:本研究收集了来自浙江大学医学院附属第二医院的健康对照组尿液样本和CRC患者尿液样本,通过固相萃取(solid phase extraction,SPE)对收集到的人体尿液样本进行预处理后,运用建立好的UPLC-MS/MS方法测定尿液中5-mdC、5-hmdC、5-mrC、5-hmrC和8-OHG的含量,以尿肌酐(creatinine,Cr)水平作为对尿液浓度的校正因子,并运用SPSS软件对校正后的修饰核苷浓度进行统计分析。结果:首先,CRC患者尿液中的8-OHG含量明显高于健康对照组(P<0.0001);CRC患者的亚组分析发现,年龄≥65岁的受试者尿液中的8-OHG含量显著高于年龄<65岁的患者(P<0.01);性别和吸烟史对于人体尿液中的8-OHG的含量没有影响(P>0.05)。其次,与健康志愿者组相比,CRC患者尿液中5-mdC、5-hmdC、5-mrC和5-hmrC的含量均显著降低(P<0.05),且男性尿液中的5-hmrC显著低于女性尿液中5-hmrC的含量(P<0.05),CRC患者组有吸烟史的受试者尿液中的5-hmrC显著低于不吸烟者尿液中5-hmrC的含量(P<0.05)。结论:本研究通过建立准确、灵敏、稳定、快速的UPLC-MS/MS法定量分析人尿中5-mdC、5-hmdC、5-mrC、5-hmrC和8-OHG的含量,得到CRC患者尿中5-mdC、5-hmdC、5-mrC和5-hmrC含量显著低于健康对照组,而CRC患者尿中的8-OHG含量显著高于健康对照组,提示5-mdC、5-hmdC、5-mrC和5-hmrC和8-OHG可能可以成为结直肠癌早期诊断的无创性生物标志物。此外,尿中修饰胞苷和修饰鸟苷水平的变化可能是结直肠癌的一个共同特征,这将有助于研究甲基化、羟甲基化、氧化应激对结直肠癌形成和发展的影响。