老鹳草微丸药理学研究及药材RAPD分析

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老鹳草为铭牛儿苗科老鹳草属植物,多年生草本,性辛、苦、平,归肝、肾、脾经,中医用于风湿痹痛、麻木拘挛、筋骨酸痛、泄泻痢疾等证。 本课题是在前两期本专业研究生课题基础上,采用小鼠耳肿胀、醋酸扭体、大黄致泻及推进小鼠小肠运动实验对老鹳草微丸进行了药理学研究。结果表明:该药具有抗炎、镇痛、止泻的功效。急性毒性实验和长期毒性实验证明:老鹳草微丸毒副作用小,长期服用对脏器无损伤,口服安全,为其临床实验提供了理论依据。我国老鹳草资源丰富,为了从分子水平上掌握老鹳草属植物种间的遗传差异,本人对本属原植物和商品药材以及同科不同属植物天竺葵进行RAPD分析。 传统中药材品种鉴别受基源、环境条件等影响,有时不可靠,而RAPD分子标记技术不受植物的显、隐性关系及环境条件和发育条件的影响,可从分子水平上建立比较客观的中药材质量鉴别标准。本实验旨在通过RAPD技术研究老鹳草属药用植物种间的遗传特征,鉴别该属植物,探讨物种间的亲缘关系,为老鹳草属药用植物的基源鉴定建立新方法,为植物分类提供分子水平的依据:通过正交实验优化RAPD反应体系,揭示RAPD反应体系中的Mg+,dNTP,TaqDNA聚合酶、引物和模板DNA5个重要因素之间存在交互作用,优化各因素后,建立的RAPD反应体系,其稳定性与重现性良好,适合用于老鹳草属药用植物RAPD扩增。 应用RAPD技术构建了老鹳草属药用植物DNA指纹图谱,采用数据分析NTSYS软件计算了各种群的遗传距离和性状差异,构建了UPGMA聚类树,结果表明:老鹳草属植物种间遗传多态性丰富,RAPD技术能够有效的用于该物种的鉴别,从而在药材基源控制上,保证了鼠掌老鹳草微丸的原药材来源可靠。
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