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本文以大平二号蚯蚓为原料,对其体内超氧化物歧化酶的理化性质以及提取条件进行了研究,得出以下几点结论: 1.蚯蚓在自然清水中排出体内泥砂需要24h左右,而采用5%硫酸钠和9%硫酸镁处理可使蚯蚓排砂时间分别缩短到18min和30min,提高SOD活性分别为27.2%和27%。 2.在蚯蚓SOD提取过程中外加铜、锌离子可使酶活性提高。单独加铜离子时最适浓度为0.5mmol·L-1,可以提高蚯蚓SOD活性17.0%;单独加锌离子处理时最适浓度为0.04mmol·L-1,提高蚯蚓SOD活性为16.0%;以0.04mmol·L-1锌离子浓度和0.33mmol·L-1铜离子浓度配合,为提高蚯蚓SOD活性的最佳浓度配比,能提高蚯蚓SOD活性19.6%。铜、锌离子处理的SOD同工酶谱分析表明:铜、锌离子处理只提高各同工酶的活性,不影响其带数。 3.温度、pH、提取液体积对蚯蚓SOD活性均有一定的影响。蚯蚓SOD是一种热稳定性很高的酶,35~40℃表现出最高活性,50℃后酶活性降低到最高活性的62.2%;同工酶分析表明50℃后使SOD部分同工酶失活。SOD对pH值变化也是比较稳定的酶类,蚯蚓SOD的最适pH值为7.8~8.2;SOD同工酶分析表明:pH主要影响SOD同工酶的活性,只在pH9.0时有部分同工酶带的丢失。提取蚯蚓SOD的最适提取液体积为蚯蚓鲜重的4倍(ml/g)。 4.通过不同硫酸铵饱和度沉淀蚯蚓SOD研究发现:蚯蚓SOD活性主要集中在60~90%硫酸铵饱和度范围内;这段范围沉淀出的SOD粗产品比活为229.6(U/mg),产率为55.1%。 5.通过不同浓度丙酮对蚯蚓SOD沉淀研究发现:蚯蚓SOD活性主要集中在丙酮浓度0.7~1.2V范围内,这段丙酮浓度范围提取出的SOD粗产品比酶活为132.1(U/mg),产率为64.9%,其SOD同工酶分析表明:丙酮沉淀所得产品中含有蚯蚓原液同工酶6条中的5条。 6.对丙酮和硫酸铵沉淀分离的蚯蚓SOD产品进行POD同工酶分析表明:所得SOD粗产品中不含有过氧化物酶(POD)。