【摘 要】
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该研究的实验材料是从中国小麦上分离纯化筛选出的PAV分离物,用RT-PCR的方法得到其外壳蛋白(CP)基因的cDNA,克隆和序列测定后,确认该基因是由600个核苷酸组成,编码199个氨基
【出 处】
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中国农业科学研究院 中国农业科学院
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该研究的实验材料是从中国小麦上分离纯化筛选出的PAV分离物,用RT-PCR的方法得到其外壳蛋白(CP)基因的cDNA,克隆和序列测定后,确认该基因是由600个核苷酸组成,编码199个氨基酸.同源性分析表明,该基因确为编码PAV外壳蛋白的基因,但与国外发表的PAV株系分离物的CP基因差异较为明显,核苷酸同源性为81﹪左右.构建了编码该基因(CN-PAV CP)和编码GPV与CN-PAV双价CP基因的植物表达载体pPPI10和pPPI14,分别用花粉管通道法将这两种质粒导入了小麦品种北京837,各获得了800粒和582粒转化植株种子.经Kan筛选,Dot杂交、PCR和Southern分析方法鉴定,用pPPI10和pPPI14转化分别获得了18和2棵阳性转基因植株,转化率各为2.5﹪和0.36﹪.温室和田间抗病毒接种试验,表明部分转基因植株对病毒的侵染表现出发病症状较轻,与未转化对照株相比,其发病时间明显延迟.
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