【摘 要】
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本研究的主要内容与结果如下:1、利用同源克隆方法首次克隆得到了猪5-HT4R基因全长编码序列(CDS),同源性比较分析发现所获CDS序列和所编码的氨基酸序列与人、鼠、狗等5种动物5-HT
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本研究的主要内容与结果如下:
1、利用同源克隆方法首次克隆得到了猪5-HT4R基因全长编码序列(CDS),同源性比较分析发现所获CDS序列和所编码的氨基酸序列与人、鼠、狗等5种动物5-HT4R基因CDS和氨基酸序列具有高度的同源性,可以确定其属于5-HT4R家族,进一步分析发现所获氨基酸的C末端结构与其它物种的5-HT4R基因b亚型的结构相一致,因此可以确定该基因为猪的5-HT4R基因b亚型。
2、应用生物信息学的方法预测猪5-HT4R蛋白质的结构和功能。结果表明猪5-HT4R是一种膜受体蛋白,属于G蛋白偶联受体超家族,包含一个GPCR结构域,包括4个胞外域、7个跨膜域和4个胞内域,分别有95、161、146个氨基酸残基,其中跨膜域的氨基酸序列具有高度保守性,而胞内域的C末端结构存在很大的变异。猪与人和其他哺乳动物的5-HT4R具有相似的氨基酸结构和功能。
3、利用半定量RT-PCR和实时荧光定量PCR两种方法检测猪5-HT4R基因在不同组织中的表达规律。结果发现其广泛表达于不同组织中,但不同组织内的表达量却存在差异,其中较高地表达于脑组织和肠组织中,中等程度表达于心、脾、肺、肾和胃,较低表达于肌肉和肝脏中。
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