利用转基因细菌防治害虫具有良好的应用前景。阴沟肠杆菌是一种昆虫肠道菌，适应昆虫肠道微环境，容易转移外源基因，是转基因操作的理想载体。tc毒素基因是昆虫病原线虫共生菌中的杀虫基因簇，其中tcdA1、tcdB1和tccC1共同编码完整的Tc毒素复合物，已被证实对多种害虫有口服毒性。但是只有同时表达这三个基因才能显示对昆虫的完整毒性。本论文旨在构建带有tcdAl、tcdB1和tccC1基因的阴沟肠杆菌，为利用转基因细菌防治害虫提供材料。　　 从昆虫病原线虫共生菌Photorhabdus luminescens TT01中克隆tccC1基因，构建了大肠杆菌表达系统。SDS-PAGE检测到与完整tccC1融合蛋白大小一致的特异性条带，Westem Blot分析表明此条带中的蛋白具有His.tag融合标签。　　 将Lac启动子、tccC1基因、硫酸链霉素抗性基因(Sm)、绿色荧光蛋白基因(gfp)拼接，构建Lac-tccCl-Smr-gfp多顺反子；再将多顺反子插入转座载体pMini-Tn5的NotI位点构建具有Tn5转座功能的重组质粒；然后将携带重组质粒的大肠杆菌S17-1(λpir)与带有tcdA1、tcdB1的受体阴沟肠杆菌进行双亲接合得到重组工程菌。质粒提取和基因组PCR检测结果显示，Lac-tccCl-Sm-gfp已经插入到受体阴沟肠杆菌的基因组中；经RT-PCR检测，tccCI在所构建的工程菌中实现了转录；另外，工程菌获得了硫酸链霉素抗性，说明Sm得到了表达。本论文成功构建了带有完整Tc毒素复合物编码基因(tcdA1、tcdB1和tccC1)的重组阴沟肠杆菌。　　 本研究结果为利用转tc毒素基因的阴沟肠杆菌防治害虫奠定了基础，也为进一步研究Tc毒素复合物的毒性机制提供了研究材料。