铅暴露AD模型大鼠脑不同区域NMDA受体亚基(NR1、NR2A、NR2B)表达的研究前言N-甲基-D-天冬氨酸(N-methy-D-aspartate，NMDA)受体是离子型谷氨酸(Glutamatic acid)受体的一个亚型，通过对其药理、生理、病理等方面的研究已经证实，NMDA受体在生物发育过程中有着重要的生理作用，可调节神经元的活性、树突、轴突结构的发育及突触可塑性等，在神经元回路的形成及学习和记忆的突触机制中，NMDA受体亦起着关键作用。先前的研究表明，谷氨酸诱导的神经毒性可能干扰许多神经障碍性疾病包括阿尔茨海默症(Alzheimer’s disease，AD)，亨廷顿氏病(Huntington’s disease)，肌萎缩性侧索硬化和癫痫中正常的谷氨酸传递和谷氨酸受体激活。也有报道表明谷氨酸受体能与淀粉样前蛋白或β-淀粉样蛋白相互作用，它们能对神经元产生有益或有害的作用。这些结果表明NMDA受体在阿尔茨海默症(AD)的神经生物学中发挥重要的作用。AD动物模型的建立是研究AD的基础。回顾对AD的研究，国内外众多的实验室，依据AD的临床特点和病理特征，分别从不同角度研制了多种动物模型，然而，包括转基因动物在内的AD动物模型，均不能完全模拟、复制出AD的主要病理、生化、神经递质及行为学等方面特征性变化，严重制约着关于AD发病机制及防止作用的深入研究。因此，本研究采用了铅暴露大鼠建立AD大鼠模型，研究NMDA受体在AD大鼠学习记忆障碍中的变化，探讨AD可能的发病机制。方法1、动物及模型制备实验在40只一月龄Sprague-Dawley(SD)中进行，将鼠雌雄不拘，随机分成5组，其中对照组8只，喂蒸馏水。其余4组各8只为铅暴露组，分饲0.1％、0.2％、0.5％、1.0％用蒸馏水配制的醋酸铅。3周后娩出子鼠，子鼠21天起断乳，喂以母鼠相同的饮水并单独饲养。2、被动回避反应(passive avoidance response，PAR)训练。3、采用Western blot技术，测定NR1、NR2A和NR2B亚基蛋白在AD模型大鼠脑中额叶皮质、新小脑、海马及纹状体中的表达情况。4、采用RT-PCR技术，测定NR1、NR2A和NR2B亚基mRNA在AD模型大鼠脑中额叶皮质、新小脑、海马及纹状体中的表达情况。实验结果1、AD模型大鼠中NR1、NR2A和NR2B亚基的蛋白水平在各个脑区均有不同程度的下调。2、AD模型大鼠海马区NR1亚基蛋白表达明显减弱，额叶皮质和纹状体次之新小脑区无明显减弱。3、NR2A亚基蛋白水平在AD模型大鼠额叶皮质、新小脑区、海马及纹状体中均有不同程度的下调，其中海马区的下调趋势最为明显，额叶皮质和纹状体次之，新小脑区最弱。4、NR2B亚基蛋白水平在AD模型大鼠四个脑区中的表达也均有不同程度的下调，其中海马区、额叶皮质及纹状体的下调趋势均很明显，新小脑区无明显下调趋势。5、正常对照组大鼠NR1、NR2A亚基m RNA表达新小脑较强，其余各区无差异，NR2B亚基m RNA额叶皮质及新小脑表达较强。6、AD模型大鼠组三种亚基的m RNA表达均有不同程度的下调。AD模型大鼠中各区NR1亚基m RNA表达均有所降低，其下调趋势趋于一致；NR2A亚基m RNA在AD模型大鼠中额叶皮质、新小脑区、海马及纹状体的表达下调趋势均很明显；NR2B亚基mRNA在额叶皮质、新小脑区的表达趋势下降最显著，纹状体次之，海马最次之。结论NMDA受体亚基NR1，NR2A和NR2B的蛋白水平和m RNA水平在AD模型大鼠额叶皮质、海马、新小脑及纹状体均有不同程度的下调。