自阿片受体被提出和发现其分布后，其药理学特征得到充分阐述和重点关注，尤其是近20余年随着非离子变性剂 CHAPS的使用以来，μ，κ和σ等经典阿片受体得到克隆和纯化，其药理研究取得了许多实质性进步并持续成为生命科学领域的研究热点之一，阿片类药物的镇痛、耐受及成瘾机制以及对新型阿片受体拮抗剂的作用的阐释和应用亟待人们进一步揭示。 纳美芬作为一种具有高选择性和特异性的纯吗啡受体拮抗剂，化学名称为(5α)-17-环丙基甲基-4，5-环氧基-6-亚甲基-3，14-二羟基吗啡喃盐酸盐。它能与μ、к、δ各型阿片受体结合，其中与μ受体结合作用最强。在国外，其在人体体内的药代动力学过程已得到阐明。其临床上，它具有传统的阿片受体拮抗作用，故可用于抗休克辅助治疗：吗啡类药物急性中毒的治疗以及对戒毒患者复吸的预防：酒精中毒的急救、手术后的麻醉催醒：还可以用于心力衰竭、预防戒毒患者复吸、治疗脊髓损伤、胃肠功能紊乱；脑保护；减肥等，是阿片受体拮抗剂纳络酮和纳曲酮的理想替代品。新近的研究显示其对病理性赌博和搔痒症具有治疗作用，并获得治疗风湿性关节炎的专利，而且由于其对神经内分泌的刺激作用，能增加生长激素和催乳素的分泌，减少甲状腺素和黄体生成素的分泌，可用于治疗阳痿、闭经等性功能障碍。而且，其特点是作用时间长，用药剂量小，安全范围广，且对阿片受体无激动作用，不产生依赖性，具有高效低毒的优势。在国内，盐酸纳美芬注射液被列为国家第3.1类新药，经国家食品药品监督管理局批准进行临床研究(临床研究批件号：2005L01754，灵宝市豫西药业有限责任公司研制)。按照《药品注册管理办法》的有关规定，盐酸纳美芬注射液应进行人体药代动力学研究。为研究其在我国健康人体内的药动学特性，我们参照文献建立高效液相色谱-质谱法(HPLC-MS) 测定血浆中纳美芬浓度的方法，分析12名健康受试者静脉给药后的血药浓度，药动学各参数用PKS软件进行统计分析，旨在为临床用药提供参考依据。 目的： 探讨盐酸纳美芬注射液在中国健康人体内的药代动力学行为，为临床制定合理的给药方案提供依据。 方法： 1 血样采集 1．1 单剂量试验采用随机、自身交叉对照试验，将12例受试者随机分为A、B两组，每组6例，男女均等，在Ⅰ、Ⅱ阶段分别交叉静脉注射给药盐酸纳美芬1mg或2mg，交叉前有1周清洗期。每例受试者均于用药前在前臂静脉安置留置针抽血，用药前采空白血约4ml，再分别于安置留置针给药后5min，0.25、0.5、1、2、3、4、6、8、10、12、24、36、48h分别采血4mL/次，3000转/min离心5min，取血浆，分双份于-30℃下冰柜保存，待分析。 2．2 多剂量试验8-12名健康受试者于单剂试验结束1周后开始进行多剂量试验，分别与每日早、晚7：30时各静脉推注2mg，连续用药6日，于第4、5、6日用药前和第6日用药后5min，0.25、0.5、1、2、3、4、6、8、10、12、24、36、48h抽取肘静脉血5mL/次，3000转/min离心5min，取血浆，分双份于-30℃下冰柜保存，待分析。 2 生物样本中的药物测定采用HPLC-MS血药浓度检测方法2．1 色谱条件色谱柱：Agilent Zorbax Eclipse XDB-C<,18>(4.6mm×150mm，5um)； 流动相：0.02mol·L醋酸胺：甲醇 (30∶70，V/V)，流速：0.8mL·min<'-1>； 质谱条件：APCI离子源，喷雾N<,2>压力60psi，干燥N<,2>流速7L·min<'-1>，干燥N<,2>温度350℃，APCI气化室温度400℃，电晕针电流4μA，毛细管电压4250V，毛细管出口电压120V； 离子化模式：正离子化(positive)； 扫描方式：多重反应监测(MRM)； 用于定量分析的离子反应： m.z 340→322 (纳美芬) 和m/z 328→310(纳络酮)。 2．2 血浆样品的处理精确吸取血浆1 mL置带塞10 mL玻璃离心管中，加入内标溶液(64μg·L<'-1>纳络酮甲醇溶液)50μL，震荡混匀，以0.02 mol·L<'-1>氢氧化钠溶液200μL碱化，加乙酸乙酯-二氯甲烷(4∶1，V/V) 3 mL震荡30s，3500 r·min<'-1>离心10 min，吸取上清液置5 mL带塞磨口玻璃离心管中，37℃真空干燥箱中干燥至干，残留物加入流动相200μL溶解，涡流混合，3000r·min<'-1>离心5 min，取40μL上清液进行HPLC/MS分析。 2．3 方法专属性取6名受试者服药前空白血浆各1 mL。在“2.1”色谱条件下测得的“1”中来源空白血浆、含药血浆及受试者给药后血样的HPLC-MS色谱图分别见图1-A、1-B和1-C。纳美芬和纳络酮的保留时间分别约为2.5和3.4 min。结果表明，空白血浆中的内源性物质不干扰纳美芬和纳络酮的测定。 2．4 标准曲线的制备于健康人空白血浆1 mL中分别加入2，5，10，20，50，100，150，200μg·L<'-1>的纳美芬甲醇溶液各50μL，震荡5 s，即得0.1，0.25，0.5，1，2.5，5，7.5，10μg·L<'-1>的纳美芬血浆样品，按照“2.2”方法处理后进行HPLC-MS测定。以血浆中纳美芬浓度(C)为纵坐标，药物峰面积与内标峰面积之比(F)为横坐标作图，用最小二乘法进行回归运算，求得的直线回归方程即为血浆中纳美芬标准曲线。 2．5 方法精密度、准确度和回收率在空白血浆1 mL中分别加入5，100，150μg·L<'-1>的纳美芬甲醇溶液50μL，配制成0.25、5、7.5μg·L<'-1>的3个质量控制(QC)样品各5个，连续测定3天，根据当天的标准曲线，计算QC样品的测定浓度，根据QC样品结果计算本法的准确度和精密度。 3 指标检测： 主要药动学参数C，T<,max>，T<,1/2>，AUC<,0-48>，AUC<,0-∞>血药浓度波动系数，AUCss和Cav；不良反应情况。 4 统计分析 列出受试者静脉推注盐酸纳美芬注射液后的血浆纳美芬浓度和血药浓度-时间曲线。将各受试者给药后各时间点血浆纳美芬的浓度数据(均以X±s表示)输入计算机，用上海宏能软件有限公司编写的PKS程序对药-时数据进行拟合，求算有关药动学参数。P<0.05为有显著性差异。 结论: 采用高效液相色谱-质谱分析法测定纳美芬药物浓度结果准确、灵敏度高。该药健康受试者的药-时曲线符合静脉推注二室模型。该药的半衰期为12小时，静脉推注后5min药物浓度达最高峰，12名健康受试者单剂量静脉推注1mg或2mg C<,max>分别为(4.25±1.19)μg·L<'-1>和(7.34±1.56)μg·L<'-1>，单次静脉推注2mg的C<,max>，AUC<,0-48>，AUC<'0-∞>分别是1mg的1.73、1.97、1.82倍。试验中副反应以头晕，恶心为主，高剂量应用时耐受性差。