基于空间分离的微流控介电泳细胞分选芯片的应用基础研究

来源 :华南理工大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:dbsoldier
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近年来,基于介电泳技术的微流控细胞分选芯片以其装置简单、操控简便、对细胞伤害小以及无需额外标记等优势,在临床医学、生物医学工程、细胞生物学等领域受到了越来越广泛的关注。针对平面二维微电极产生电场的强度低、分布范围小的缺陷,以及传统微电极制备方法工序繁杂、成本高等问题,本论文以实现细胞的连续分选为最终目的,设计并采用丝网印刷技术制备了具有三维微电极结构的微流控介电泳细胞分选芯片并利用该芯片对血红细胞进行了高效连续的分选。首先,设计了波浪型和城垛型两种三维微电极结构,并利用Comsol4.3a多物理仿真软件建立相应的三维模型进行电场仿真,探究了微电极形状、间距、厚度对其产生的电场强度和电场分布的影响,优化出两种微电极的结构参数,然后根据微电极结构设计相应的微通道结构。其次,分别采用丝网印刷技术和光刻模板法制备芯片的微电极和微通道,并通过氧等离子处理实现对微电极和微通道的封接。在制备芯片的过程中,探究了影响微电极印刷质量的各项因素,如丝印机参数设置、丝印网版、油墨类型等,此外,根据微通道结构优化了光刻模板法的工艺参数。再次,选择了血红细胞和聚苯乙烯微球作为实验对象,将具有大小合适孔洞的聚二甲基硅氧烷(PDMS)与微电极封接制得简化芯片,利用简化芯片探究了不同外加电压、频率和溶液电导率下血红细胞和聚苯乙烯微球的介电特性,并绘制出相应的介电图谱,为两种粒子的连续分选提供理论依据。同时,通过测定血红细胞的溶血率对不同实验条件下的细胞活性进行了表征。最后,根据血红细胞和聚苯乙烯微球的介电图谱以及血红细胞的溶血实验结果,初步选取了实验参数对单血红细胞溶液和单聚苯乙烯微球溶液分别进行动态分选实验,探究了溶液流速、电信号电压、电信号频率及溶液电导率对两种粒子各自分选效率的影响,并优化得到分选两种粒子的最佳实验参数,最终实现了将血红细胞从两种粒子混合溶液中高效连续的分选。本论文的实验结果说明了利用丝网印刷法制备可连续分选细胞的微流控介电泳芯片是切实可行的。
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