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研究目的：研究青葙子(Celosiae Semen)中的三萜皂苷类化合物青葙总皂苷(Total Ceosins,TCS)抗动脉粥样硬化的药理作用及其机制,为TCS抗动脉粥样硬化新药的研制及青葙资源的开发利用提供依据。研究方法：动物实验：通过给予ApoE基因敲除(ApoE-/-)小鼠高脂饮食12周,建立动脉粥样硬化模型,设置TCS 3个给药剂量：10mg/kg、30mg/kg、90mg/kg体重,给药4周,观察对动脉粥样硬化小鼠斑块面积和稳定性的影响。体外实验：通过ox-LDL刺激腹腔巨噬细胞24h,建立动脉粥样硬化体外模型-泡沫细胞模型。在此基础上,分别从TCS对腹腔巨噬细胞的吞噬、泡沫细胞的形成、相关基因mRNA的表达、细胞自噬相关蛋白的表达以及对自噬小体的形成和自噬流的影响来探讨其药理作用机制。研究结果：TCS抗动脉粥样硬化的药效学研究：TCS 10 mg/kg-90 mg/kg剂量范围内,能够显著性减少ApoE-/-小鼠主动脉中斑块相对面积,减少主动脉内壁增生,对动脉粥样硬化有明显治疗作用。具体如下：1.主动脉整体油红O染色结果显示：模型组主动脉中有大量的斑块存在,主动脉上游斑块较大,向管腔中凸起明显,至主动脉下游仍有较多斑块存在。给与TCS后,主动脉内斑块不同程度的减少,可见斑块区域减少,斑块面积明显减小,在主动脉的上游可见成型的小颗粒状斑块,在主动脉中下游斑块急剧减少,几乎不可见。2.主动脉根部横切面油红O染色病理切片显示：模型组主动脉管腔内脂肪堆积明显,三个主动脉瓣对应的动脉壁上均有斑块,且斑块较厚,占整个动脉管腔的横切面积较大。给药后,主动脉根部管腔脂肪沉积减少,管腔壁斑块面积减小,TCS中剂量和高剂量组,部分主动脉壁较为光滑,未见明显的脂肪堆积和斑块存在。3.主动脉根部横切面H&E染色病理切片显示：模型组主动脉管腔内,斑块面积较大,在部分斑块中出现坏死区域且有大量的胆固醇积累；TCS给药组斑块体积不同程度的减少,坏死核心面积减少且胆固醇累积明显减少。4.主动脉根部横切面天狼猩红染色病理切片显示：模型组斑块中总胶原量少,Ⅰ型胶原/Ⅲ型胶原的比值小,表明斑块趋于不稳定；与模型组相比,TCS给药组斑块中总胶原量较多,Ⅰ型胶原/Ⅲ型胶原的比值大(P<0.01),表明斑块趋于稳定。5.主动脉根部横切面组织免疫荧光观察结果显示,与模型组相比,TCS给药组主动脉根部与自噬相关的自噬小体的数量明显增多(P<0.01),推测其在动脉粥样硬化中的作用可能与促进自噬有关。TCS抗动脉粥样硬化机制研究：体外实验证明,TCS能够减少巨噬细胞对脂质的吞噬作用,当TCS浓度为50 gg/mL时,巨噬细胞对脂质的吞噬显著性减少(P<0.01)在12.5 μg/mL～50.0 μg/mL剂量范围内,能够显著减低泡沫细胞的形成率(P<0.05或P<0.01),减低TC含量(P<0.01)。在mRNA水平上,在12.5 μg/mL～50.0μg/mL剂量范围内,清道夫B类受体CD36和清道夫A类受体SR-A1分别最大下调了56.5%和62.4%,ATP结合盒转运蛋白A1 (ATP-binding cassette transporter A1, ABCA1)和ATP结合盒转运蛋白G1 (ATP-binding cassette sub-family G member 1, ABCG1)分别上调了3.1倍和1.9倍。在蛋白水平上,在12.5-50.0 μg/mL剂量范围内,轻链蛋白3(light chain 3,LC3)和自噬蛋白beclinl表达量增加,表明TCS能够促进细胞自噬水平增加。电镜下观察,TCS组中自噬小体数量明显高于ox-LDL刺激组中自噬小体数量。激光共聚焦显微镜下观察,TCS组自噬溶酶体／自噬体比值显著性高于ox-LDL组(P<0.01),表明TCS能够促进自噬溶酶体的形成。结论：TCS能够显著减小主动脉内斑块面积,从而对动脉粥样硬化发挥较好治疗作用。在细胞水平,TCS能够减少巨噬细胞对脂质的吞噬,减少泡沫细胞的形成；在mRNA水平上,TCS能够下调CD36的表达,同时上调ABCA1、ABCG1的表达；TCS能够促进细胞内自噬水平的增加,并且促进自噬流进程。TCS对动脉粥样硬化的治疗作用可能与促进细胞自噬有关。