前言 癫痫(Epilepsy)是神经科的一种常见病。有研究表明：反复痫性发作或癫痫持续状态(status epilepsy，SE)可导致脑组织尤其是海马结构等易损区的损伤，而脑损害性病变又可引起痫性发作；两者互为因果，互相转化。 致痫成鼠与海马损伤的关系已研究的较为广泛和深入，而幼鼠方面的研究相对较少。流行病学研究表明儿童癫痫的发病率明显高于成人，因此，有关幼鼠早期痫性发作的动物实验研究显得相当重要。 本实验目的是：采用氯化锂-匹罗卡品致癫痫持续状态幼鼠模型，经常规病理及电镜观察海马结构形态学改变，并应用Timm法进行苔藓纤维发芽(mossy fiber sprouting，MFS)方面的观察。 材料与方法 健康生后15～20天Wistar幼鼠54只，体重37～45g(由沈阳市药品检验所实验动物中心提供)。随机分成三大组，每组18只。Ⅰ组：生理盐水对照组；Ⅱ组：地西泮干预组；Ⅲ组：实验组。实验组采用氯化锂-匹罗卡品联合腹腔注射(ip)，致幼鼠SE。生理盐水对照组以相同液体量的生理盐水取代匹罗卡品，其余用药步骤及方法同实验组。地西洋干预组在给予匹罗卡品30 Inn前给予地西洋kmg／kg广，目的是不引起痫性发作。上述各组动物均在7天后灌流固定处死，观察海马结构形态学改变和苔留纤维发芽的情况。 实验结果 1．理一匹罗卡品致SE幼鼠行为观察：生理盐水组动物无任何抽搐发作迹象；地西洋干预组动物亦无任何抽搐发作迹象，个别动物仅出现兴奋表现；实验组幼鼠最初表现为躁动、搔抓／‘洗脸样活动”、面部抽搐、单肢阵挛、湿狗样抖动和平衡失调，之后很快表现肢体强直阵挛伴站立及前肢阵挛，进一步发展达到V级，即全身强直一阵挛发作伴站立、跌倒，呈SE。 2，光镜下海马结构形态学观察：生理盐水组和地西洋干预组未见任何损害性改变；实验组CA；区和CA。区及齿状回可见许多神经元发生变性、坏死。变性的神经元肿胀，体积增大，典型的多角形变为圆形或三角形，胞核偏位。坏死的神经元胞浆浓缩、深染，核碎裂。星形胶质细胞胞体增大，胞浆淡染。CA。区未见明显改变。 3．电镜下海马结构的超微结构观察：实验组部分神经元胞体浓缩变性，核皱缩变形，核膜不规则内陷；粗面内质网增生，池腔扩张；线粒体肿胀，崎断裂呈空泡状，周围胞质电子密度减低；内质网的核糖体脱落，游离核糖体解聚；胞质中微丝增多；胶质细胞可见有空泡变性。生理盐水组和地西伴干预组无明显的超微结构改变。 4．Timm法观察苔薛纤维发芽：实验组与生理盐水组及地西排干预组相比 CA。区可见明显的苦薛纤维发芽。CA。区各组评分（元切）结果分别为：生理盐水对照组1N．33。O．四八地西洋干 ·2·预组11（0．42 z 0．52）；实验组皿（互．83。0．39）。各组数据进行两两比较秩和检验。结果显m qI。二 5．73，P＜0．01；qn。＝8＊0，P＜0．01。生理盐水对照组与地西洋干预组相比无统计学差异 q11二0．53，P＞0．of。在齿状回区，实验组的内分子层也可见明显Tinun染色颗粒，而生理盐水对照组和地西洋干预组却几乎没有Tinun染色颗粒。各组数据两两比较秩和检验，结果表明实验组齿状回内分子层万评分明显高于其他两组，具有统计学意义（分别为ql。二5＊9，P＜0．01；q。。＝8．08，尸＜0．01）。生理盐水对照组与地西洋干预组相比无统计学差异（q；u＝0．55，P＞0＊1）。 讨 论 理一匹罗卡品腹腔注射致痫大鼠模型是近年来国外应用较多的一种公认的边缘系统病性发作动物模型，被认为是具有与人类领叶癫病相似特征的边缘叶致痫鼠模型。匹罗卡品是乙酸胆碱能毒章碱类受体激动剂，胆碱能受体兴奋可激活谷氨酸兴奋通路诱发SE，导致海马结构等易损区兴奋毒性损害。氯化程对匹罗卡品致痫过程具有协同作用，可减少匹罗卡品用量，降低毒副作用，使致痫鼠存活率增加，尤其是幼鼠。 成鼠SE后出现海马CA；区人A。区及齿状回广泛的神经元脱失和苔蔡纤维发芽已成为大量实验的共识。但有关幼鼠该方面研究得出的结论不一。本实验研究发现幼鼠SE后海马结构确有损伤。地西洋干预组事先有效地抑制了动物的抽搐发作行为，结果未见神经元损害。说明海马结构神经元损伤与长时间抽搐发作引起的缺氧、缺血性变化有一定的关系。至于匹罗卡品所致兴奋性神经毒素损害所起的作用或作用程度尚需进一步探讨。可以肯定积极控制癌性发作对减少海马区神经元的损伤有积极的防治意 ·3·义，尤其对幼儿早期的长时间抽搐，有必要尽早采取控制痫性发作的措施。 CA；及 CA。区为易损区也符合血管解剖分布。海马结构的前下部分由前脉络膜动脉和大脑中动脉双重供血，CA；区和CA。区仅由脉络膜前动脉供血，经过较长的分支和扭转才达到CA；区，说明易损区为乏血管带。 苔薛纤维发芽是成人领叶癫痛一种常见的病理