大黄素甲醚对稻瘟菌的生物活性及作用机理研究

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稻瘟病是由稻瘟菌(Magnaporthe oryzae)引起的、危害最重的水稻病害,对世界粮食安全生产构成严重威胁。目前,防治稻瘟病主要依靠化学合成农药,但是由于化学合成农药的过量使用导致抗药性和环境污染等问题,稻瘟病的防治急需高效生物农药及其他有效的措施。大黄素甲醚属于蒽醌衍生物,可以从大黄、虎杖等多种植物体中提取得到,对白粉病具有较高的活性,已被开发为防治白粉病的植物源杀菌剂,大面积用于黄瓜白粉病的防治。但以前关于大黄素甲醚的研究大多是针对专性寄生菌白粉菌,对于兼性寄生菌研究较少。本研究的目的是明确大黄素甲醚对兼性寄生菌稻瘟菌的生物活性及其作用机理,为该生物农药安全、有效的应用提供依据。室内试验结果表明,大黄素甲醚对稻瘟菌的菌丝生长有明显抑制作用,EC50为6.72 mg L-1;用大黄素甲醚浓度为20 mg L-1处理离体叶片或60 mg L-1处理整株时,对稻瘟菌的防效均在90%以上。田间试验结果表明,大黄素甲醚对水稻叶瘟和穗瘟有良好的防治效果。在水稻分蘖期,每公顷喷施大黄素甲醚11.25 g a.i.—次或间隔一周喷施7.5 g a.i.两次,对叶瘟的防效达80%左右,和对照药剂三环唑或稻瘟灵的防效(76%)相当;在水稻穗期,每公顷喷施大黄素甲醚11.25 g a.i.,对穗瘟的防效达77%,显著高于三环唑的防效(71%)。离体条件下模拟大黄素甲醚对稻瘟菌的再侵染试验结果表明,大黄素甲醚处理浓度为40 mg L-1时,对稻瘟菌的产孢有明显抑制作用,新生孢了不能萌发,丧失致病力,防止稻瘟菌再次侵染。当其浓度低于40 mg L-1时,对产孢量反而有促进作用,且不影响新生孢子的致病力,不能防止稻瘟菌再次侵染。大黄素甲醚在离体条件下,能直接抑制稻瘟菌孢子的萌发、芽管伸长和附着胞的形成,导致孢子附着胞畸形和直径减小。在活体条件下,大黄素甲醚显著降低稻瘟菌孢子在叶片上的粘附率、抑制孢子萌发及附着胞的产生,使得稻瘟菌孢子不能成功侵入叶片角质层。大黄素甲醚处理稻瘟菌菌丝,引起菌丝各项生理指标的改变,菌丝的细胞膜通透性和几丁质酶活性增强,丙二醛含量上升,引起细胞膜和细胞壁破坏,导致细胞内的可溶性蛋白、还原性糖和丙酮酸等含量降低,影响菌体生物合成和能量代谢。此外,大黄素甲醚通过显著提高水稻的主要防御酶活性,提高水稻的主动抗病性。大黄素甲醚与三唑类杀菌剂混用,对稻瘟病有增效作用。大黄素甲醚与三环唑混用比例为9:1-7:3时,表现为增效作用,在5:5-1:9的比率时表现为加成作用。大黄素甲醚与苯醚甲环唑混用,在9:1-5:5的比例时,对稻瘟菌表现为增效作用,在3:7-1:9的比例时,表现为加成作用。添加助剂甲基化植物油和非离子型表面活性剂倍创,能显著提高大黄素甲醚对稻瘟病的防治效果。
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