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本研究旨在考察饲粮添加葡萄籽原花青素(grape seed procyanidins, GSPs)对氧化应激仔猪肝脏氧化损伤的保护效应,揭示其可能机制。试验共分5个处理组,分别为对照组(玉米-豆粕型基础饲粮,生理盐水非应激处理),应激组(玉米-豆粕型基础饲粮,Diquat应激处理),应激+50GSPs组(基础饲粮+50mg/kg GSPs, Diquat应激处理),应激+100GSPs组(基础饲粮+100mg/kg GSPs, Diquat应激处理),以及应激+50VE组(基础饲粮+50mg/kg维生素E,Diquat应激处理)。30头28日龄的健康L×Y杂交断奶仔猪随机分为5个处理,每个处理6个重复,每个重复1头猪。试验期为17天,在第10天对应激组、应激+50GSPs组、应激+100GSPs组和应激+50VE组的所有猪只按照10mg/kg BW的剂量进行腹腔一次性注射Diquat,对照组仔猪按相同原则注射灭菌生理盐水。在试验第0,10,17天对所有仔猪进行称重,试验结束后对所有仔猪进行前腔静脉采血,分离血清用于抗超氧阴离子(O2-·)能力、抗羟自由基(·OH)能力、总抗氧化能力(T-AOC)、超氧化物歧化酶(SOD)活性、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-px)活性、过氧化氢酶(CAT)活性、丙二醛(MDA)含量、谷丙转氨酶(ALT)活性和谷草转氨酶(AST)活性的测定。第17天,除应激+50GSPs组外的仔猪全部屠宰,肝脏取样用于肝细胞凋亡率、肝脏抗自由基能力和抗氧化酶活性、肝脏MDA和VE含量测定,同时以酶联免疫吸附法(ELISA)进行肝脏caspase-12含量的测定,以实时荧光定量PCR技术进行肝脏Nrf2通路、炎症反应和内质网应激相关因子mRNA表达量的测定。1、注射Diquat前饲粮添加GSPs和VE对断奶仔猪ADFI、ADG和F/G影响不显著；而添加50mg/kg GSPs能够提高应激后仔猪的ADFI, GSPs或VE的添加均能在一定程度上缓解应激仔猪饲料转化率的下降。2、饲粮添加GSPs能够提高氧化应激仔猪血清抗O2-·能力、抗·OH能力以及SOD、 GSH-px和CAT活性,降低血清MDA含量。同时发现在应激条件下饲粮添加50mg/kg GSPs与添加50mg/kg VE在血清抗氧化能力上的效果相当,而添加GSPs100mg/kg血清抗氧化效果优于50mg/kg VE组。3、注射Diquat诱导的氧化应激提高仔猪肝细胞凋亡率,导致肝细胞膜破裂,血清ALT和AST活性升高,肝脏ALT和AST活性降低,同时氧化应激降低了肝脏抗·OH能力、T-AOC、SOD和CAT活性以及VE含量,降低肝脏SOD、GSH-px、CAT的mRNA表达量,增加促炎因子TNF-α、IL-1β、IL-6、IL-8以及促凋亡蛋白Bax的mRNA表达量,降低抗炎因子IL-10和抗凋亡蛋白Bcl-2的mRNA表达量；氧化应激还明显下调断奶仔猪肝脏Keap-1mRNA的表达,上调Nrf2及其下游分子HO-1和NQO1mRNA的表达；在内质网应激方面,氧化应激明显增加内质网应激相关分子伴侣GRP78、ATF6、XBP-1、 PDIA4、CHOP的mRNA表达量,降低Ire-1mRNA表达量,同时降低肝脏caspase-12含量。4、饲粮添加100mg/kg GSPs显著抑制氧化应激诱导的仔猪肝细胞凋亡,提高应激下肝脏ALT和AST活性,降低血清ALT和AST的活性。进一步研究发现,GSPs显著提高氧化应激后断奶仔猪肝脏的抗-OH能力、T-AOC、SOD活性、GSH-px活性、CAT活性以及VE含量,降低MDA含量。同时GSPs显著降低肝脏促炎因子TNF-α、IL-1β、IL-6、IL-8及促凋亡蛋白Bax的mRNA表达量,提高SOD和抗凋亡蛋白Bcl-2的mRNA表达量,但对抗炎因子IL-10的mRNA表达量无显著影响；在氧化应激状态下,GSPs通过降低Nrf2、HO-1、NQO1的mRNA表达量,提高Keap-1的mRNA表达量以减轻ROS对仔猪肝脏Nrf2信号通路的影响；另外,GSPs通过减缓内质网应激相关分子伴侣GRP78的mRNA表达量,抑制氧化应激诱导的XBP-1、ATF6、PDIA4和CHOP mRNA表达上调,同时降低肝脏caspase-12的含量从而起到减轻内质网氧化损伤的作用。本研究结果还显示,在降低肝脏氧化损伤方面100mg/kg GSPs的总体效果要优于50mg/kg VE。综合上述结果,氧化应激能够造成仔猪肝脏氧化损伤,导致生长性能下降；饲粮添加葡萄籽原花青素能够显著提高氧化应激仔猪血清和肝脏抗氧化能力,缓解ROS对肝脏的氧化损伤,降低肝脏炎症反应,同时通过抑制线粒体途径和内质网途径的细胞凋亡通路显著降低肝细胞的凋亡率,维持肝脏细胞完整性,最终保护肝脏,维持肝脏的健康状态。同时,葡萄籽原花青素在仔猪生长性能提高方面也存在一定的促进效果,且与维生素E的效果相当。