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呼吸道合胞病毒(RSV)是引起全世界范围内婴幼儿、老人以及免疫缺陷者下呼吸道疾病的最常见病原体之一。几乎所有2周岁以下的婴幼儿都感染过RSV,每年有2.5-4%的婴幼儿因RSV的感染而住院,给全球卫生医疗事业带来了沉重的经济负担。至今为止,还没有安全并且有效的疫苗面市,palivizumab单抗(Palivizumab(?))是唯一一株经过美国FDA批准上市的用于RSV预防药物。但是由于其价格昂贵,该抗体仅仅被用于免疫缺陷及先天性心脏病等高危新生儿预防RSV的感染。同时该抗体不能治疗RSV的感染,需要长期注射并且预防效果有限,因此亟需开发出高效、价格低廉的新一代RSV预防性药物,用于婴幼儿以及老人等高危人群的预防。RSV F蛋白和G蛋白是对机体具有保护作用的主要保护性抗原。G蛋白在RSV的A、B两个亚型中的抗原变异性较大,而F蛋白高度保守,其诱导产生的中和抗体可同时抑制两个亚型的病毒感染。因此F蛋白已然成为中和抗体以及疫苗研发的主要靶蛋白。Palivizumab限制性使用说明了F蛋白上存在有效的中和表位,同时也表明Palivizumab所识别表位诱发的中和效价不足,因此需要寻找更加高效的中和表位。本实验室通过核酸载体的复合免疫方案,筛选到了一株识别新靶点的高效中和抗体5C4,体外中和评估表明其中和效价要比Palivizumab的鼠源单抗1129好50-100倍,并且小鼠动物模型预防性评估实验也表明无论是高剂量还是低剂量的5C4都可以有效预防RSV A型病毒的感染。虽然该抗体具有较好的中和活性并且很好的预防RSV的感染,但是该抗体非广谱中和抗体,只能中和RSVA型病毒,而不能中和RSVB型病毒。因此寻找识别新靶点的广谱高效的中和抗体成为RSV抗体开发的当务之急。我们利用DNA-F和rAd-F复合免疫方案进行免疫,通过四轮抗体筛选最终获得了 10株候选抗体,经过体外反应性以及中和评估等性质鉴定,最终确定这是10株抗体为识别RSVA/BprefusionF广谱高中和抗体,可以同时中和RSVA和RSV B。调取这个抗体的基因,将其CDR区与已报道表位的代表性抗体CDR区进行差异性比对。根据这些抗体的差异性初步将其分为四类,这四类代表性抗体分别为5B11、6B2、7G5、10F3。为了进一步探究这四类抗体识别表位是否为F蛋白上的新靶点,我们进行了抗体间的相互交叉阻断,实验结果表明5B11、6B2、7G5三个抗体可能识别新的表位,而10F3可能与5C4等识别表位相同。此外,小鼠模型上的低剂量抗体预防性实验结果提示5B11、6B2、7G5预防性效果与5C4相当。综上所述,5B11、6B2、7G5三株抗体有望替代5C4成为新一代广谱高效预防性抗体,同时新抗体与新靶点也为未来高效低成本的RSV药物研发提供基础,为RSV疫苗分子设计提供指导。