传染性法氏囊病(IBD)是由传染性法氏囊病病毒(IBDV)引起的鸡和火鸡的一种急性高度接触性传染病。IBD 不但引起鸡群大量死亡,更为重要的是 IBDV 能够造成鸡法氏囊器官永久性损害,引起免疫抑制,因此对养禽业造成了严重的危害。该病已在全球流行,目前 IBD 在我国已传遍各地,某些地方发病率高达 80%以上,死亡率在 30%～70%以上。防制本病的主要方法是疫苗接种。IBD 活苗和灭活苗在我国已普遍应用,起到一定作用,但免疫失败现象却普遍存在。原因是多方面的:一方面我国采用的 IBDV 疫苗株众多,制作和生产单位条件不一;另一方面是用户对疫苗的有关特征了解甚少或使用不当,导致免疫失败;再就是母源抗体的干扰。所以,为了更好地防制 IBD,研制一种安全有效的 IBD 疫苗,并制定出其科学的免疫程序和方法是很有必要的。本课题分三部分进行: 第一部分:HDS 细胞苗(自制法氏囊病细胞活疫苗)的制备。鸡胚成纤维细胞(CEF)制备时,用 0.25%胰蛋白酶对鸡胚组织消化 20min 为宜。本研究中,在细胞接种病毒时运用的是异步接种法。对不同接毒量的实验表明,每个方瓶(100ml)接毒 0.2ml 左右病毒原液为宜。接毒后 48h出现细胞病变(CPE),72h 病变达 70%～85%以上。经病毒蚀斑形成试验检测,病毒滴度达 1.0×108PFU/ml。 第二部分:自制细胞苗 HDS 的安全性和有效性实验。用不同免疫剂量免疫雏鸡,确定了最佳免疫剂量为 5.0×105PFU/ml,最小免疫剂量为 1.0×105PFU/ml。用 10 倍最佳免疫剂量免疫雏鸡,未见雏鸡出现明显临床症状,证明本疫苗安全。用最佳免疫剂量免疫雏鸡,对强毒攻击的保护率达100%,通过抗体检测,免疫后 15dAGP 阳转率达 100%,免疫后 41d ELISA抗体滴度达 9000 以上,证明本疫苗效果良好。三种疫苗对比试验证明,自制 HDS 疫苗在保护率和抗体效价方面上均优于以色列疫苗和某国产疫苗。 第三部分:IBD 母源抗体对疫苗免疫的影响。通过对含母源抗体的雏 1<WP=7>邵云龙:鸡传染性法氏囊病细胞活疫苗的研制鸡的抗体检测,得出了 IBD 母源抗体的消长规律。结果得出各组雏鸡在1~4 日龄母源抗体逐渐上升,4 日龄时达到最高峰,ELISA 抗体滴度达 4000以上,从 7 日龄开始下降,7~18 日龄则是一个缓慢下降的过程;18~25日龄抗体水平下降速度明显加快,至 25 日龄降为零。对带 IBD 母源抗体的雏鸡,我们分别在 4、7、10、14、18、21 日龄接种 HDS 细胞苗,实验结果证明在 14 日龄接种疫苗,雏鸡产生的抗体滴度能达到较理想的水平。