【摘 要】
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目的:生殖支原体(Mycoplasma genitalium,MG)是一种重要的性传播病原体,与非淋菌性尿道炎、宫颈炎、盆腔炎等疾病进展高度相关。研究表明MG对阿奇霉素、莫西沙星等药物的抗生素耐药性正在全球范围逐年增加,本研究拟通过分析本地区MG感染患者治疗情况以及阳性样本中耐药相关基因突变类型和分布,设计开发一种便捷、快速,并且能够同时进行多种抗生素耐药基因突变检测的方法,以期为临床及时提供用药
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目的:生殖支原体(Mycoplasma genitalium,MG)是一种重要的性传播病原体,与非淋菌性尿道炎、宫颈炎、盆腔炎等疾病进展高度相关。研究表明MG对阿奇霉素、莫西沙星等药物的抗生素耐药性正在全球范围逐年增加,本研究拟通过分析本地区MG感染患者治疗情况以及阳性样本中耐药相关基因突变类型和分布,设计开发一种便捷、快速,并且能够同时进行多种抗生素耐药基因突变检测的方法,以期为临床及时提供用药建议,有效阻止耐药菌株在患者中的选择及其传播,为我国生殖支原体耐药监测提供重要研究工具。方法:利用本中心患者诊疗数据回顾性分析生殖支原体流行特征以及感染患者的抗生素治疗结局。Sanger测序或琼脂糖凝聚电泳法检测生殖支原体阳性样本23S rRNA基因、parC基因、gyrA基因、16S rRNA基因突变以及tetM保护因子获得的类型和频率,通过耐药标志物与抗生素治疗结局的相关分析,阐明23S rRNA基因突变与大环内酯类抗生素耐药,parC、gyrA关键氨基酸替换与氟喹诺酮类抗生素耐药以及tetM、16S rRNA基因突变与四环素类抗生素耐药的关联性。基于上述主要耐药突变位点,设计针对生殖支原体耐药基因突变的荧光PCR检测方法,利用临床样本评估该检测方法的实验室性能及临床适用性。结果:一、近五年,本中心生殖支原体流行率为0.7%-1.28%,混合感染较为多见。回顾性研究发现,缺少生殖支原体药物敏感性指导的经验性治疗,生殖支原体感染患者首次治疗治愈率为72.73%,所有疗程总体治愈率为71.71%,超过四分之一的患者无法从治疗中获益,部分患者治疗周期长达一年以上。生殖支原体样本中23S rRNA A2058、A2059突变,parC S83、D87氨基酸替换,16S rRNA C1192T突变频率分别为64%、67.5%、22.5%,以上突变比例远高于其他国家或地区,并在不同程度上与其产生耐药性有关。二、建立的23S rRNA、parC耐药基因突变荧光PCR检测方法,与测序方法相比,具有简便快速,灵敏度和符合率高等特点。前瞻性研究中,基于耐药基因突变伴随诊断的个体化治疗方案,可以显著提高大环内酯类抗生素治疗效果(100%),生殖支原体感染患者首次治疗治愈率达88%,所有疗程总体治愈率达89.3%。结论:生殖支原体已经成为我国重要的性传播病原体之一,其流行程度仅次于沙眼衣原体。然而,传统药物敏感性试验无法在临床实验室开展,依靠个人经验的治疗方案以及生殖支原体多重耐药菌株的出现,可能使临床面临无药可医的尴尬境地,基于耐药基因突变伴随诊断的个体化治疗方案为我们提供了新的思路,但是各种抗生素的临床治疗结局与生殖支原体菌株不同突变类型之间的关系仍有待进一步深入研究。
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