两个苹果液泡膜质子泵基因H+-Ppase和H+-ATPase subunit A的抗逆功能鉴定

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液泡膜质子泵H+-PPase(VHP)和H+-ATPase(VHA)在植物的正常生长和胁迫条件下起到重要作用。本文克隆了苹果VHP1基因(MdVHP1)和VHA亚基A(MdVHA-A),分析了MdVHP1和MdVHA-A对非生物胁迫的表达响应,鉴定了MdVHP1和MdVHA-A的非生物胁迫抗性功能。主要结果如下:   1.在苹果组培苗中MdVHP1和MdVHA-A受盐、干旱、冷和热诱导,但对不同的非生物胁迫具有不同的表达响应模式。   2.MdVHP1过量表达能提高转基因苹果愈伤抗盐、干旱、冷和热能力。在胁迫条件下,MdVHP1过量表达提高了愈伤组织的脯氨酸含量,降低了丙二醛含量;因此MdVHP1过量表达通过提高渗透调节能力,减轻膜伤害来提高愈伤的抗逆能力。   此外,盐胁迫条件下,MdVHP1过量表达提高了转基因番茄Na+、K+含量;干旱条件下,其提高了转基因番茄的相对含水量和渗透势。因此,MdVHP1通过离子液泡区域化和渗透调节提高了番茄的抗盐、干旱能力。   3.MdVHA-A过量表达能明显提高转基因烟草抗盐和抗旱能力。在盐胁迫下,MdVHA-A过量表达提高了转基因烟草Na+、K+离子和脯氨酸含量,降低了丙二醛含量;在干旱胁迫下,其提高了转基因烟草的相对含水量、脯氨酸积累,降低了丙二醛含量。以上表明MdVHA-A过量表达可以通过提高离子的液泡积累和渗透调节能力来提高烟草的抗盐和旱能力。此外,MdVHA-A过量表达通过影响生长素含量促进侧根生长也是提高转基因烟草抗旱性的重要原因。   综上所诉,MdVHP1和MdVHA-A参与了植物非生物胁迫调节;二者可以作为改善植物抗盐和抗旱性的有效候选基因。
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