论文部分内容阅读
目的:成年哺乳动物海马齿状回在正常状态下存在着持续的神经发生,研究表明,这些新生神经元与认知功能密切相关。癫癎作为神经系统的一种常见疾病,具有反复发作性,每次发作的不可预知性,以及必须至少2-3年时间的服药治疗等特点。而反复癫癎发作经常伴有认知功能减退。拉莫三嗪(LTG)作为一种新型抗癫癎药物,临床研究表明可以改善癫癎患者的认知功能。而有关LTG长期应用对大鼠癫癎发作后海马神经发生有何影响,目前尚不清楚。为此,本课题采用锂-匹罗卡品诱发大鼠颞叶癫癎模型,利用5-溴脱氧尿核苷(BrdU)标记分裂细胞,通过免疫组织化学方法观察LTG对成年癫癎大鼠海马神经前体细胞增殖、存活、分化以及迁移的影响,以期为临床应用LTG提供更多的实验依据。方法:成年雄性SD大鼠随机等分为正常组、LTG组、癫癎组、癫癎+LTG组。所有动物于建模后第6天腹腔注射BrdU,分别于BrdU注射后24h和28d两个时间点处死。采用免疫组织化学方法,观察神经前体细胞的增殖以及新生细胞的存活、迁移和分化的情况。结果:1. BrdU注射后24h,癫癎及癫癎+LTG组大鼠海马齿状回增殖的BrdU阳性细胞数明显增加,与正常组和LTG组相比有显著差异(P<0.05),癫癎+LTG组增殖的BrdU阳性细胞数与癫癎组相比明显下降(P<0.05)。2. BrdU注射后28d,癫癎及癫癎+LTG组大鼠海马齿状回存活的BrdU阳性细胞数明显增加,与正常组和LTG组相比有显著差异(P<0.05),癫癎+LTG组BrdU阳性细胞数与癫癎组相比没有差异。3. BrdU注射后28d,正常组和LTG组齿状回门区内几乎没有异位迁移的新生神经元,而癫癎后新生神经元向门区内的异位迁移明显增多;癫癎发作后给予LTG并未阻止新生神经元的异常迁移。4. BrdU注射后28d,BrdU/NeuN荧光双标显示,各组新生细胞分化为神经元的比率没有差异。结论:1.癫癎发作后给予LTG能够抑制神经前体细胞的异常增殖。2.癫癎发作后给予LTG能够明显减少神经前体细胞的异常增殖,而BrdU注射后28d,癫癎 LTG组的BrdU阳性细胞数与癫癎组没有差异,提示LTG能够促进新生细胞的存活。3.癫癎发作后给予LTG不能阻止神经元的异常迁移。4.癫癎发作后给予LTG不影响神经元分化的比率。