接枝YIGSR和IKVAV多肽的水凝胶的制备及性能研究

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本论文研究目的是制备一种具有生物活性的可促进神经修复的PLEOF水凝胶,并研究其性能,以解决合成高分子水凝胶缺乏细胞识别作用的问题,同时使PLEOF水凝胶具有诱导神经再生的功能。首先,采用丙交酯开环聚合法以辛酸亚锡为催化剂、一缩二乙二醇为共引发剂合成超低分子量的PLA,并以富马酰氯连接超低分子量的PLA和PEG合成了PLEOF。1HNMR、 IR测试证实PLEOF大分子中成功的引入了不饱和的富马酸酯基团,为水凝胶的合成提供了大分子单体。采用固相多肽合成法合成YIGSR多肽交联剂和末端含双键的IKVAV多肽,红外光谱和质谱测试表明合成的YIGSR和IKVAV多肽与理论设计的结构一致。利用骨髓间充质干细胞完成IKVAV多肽促干细胞增殖实验,确定当IKVAV的浓度为0.1mmol/L时,干细胞增殖最好。采用自由基共聚法合成表面接枝IKVAV和YIGSR多肽的PLEOF水凝胶,由干细胞增殖实验,确定IKVAV多肽含量, YIGSR多肽交联剂的分子量较大,单位质量的双键浓度很低,单独使用需要较大的投料量,不利于获得具有恰当组成的凝胶,因此两种交联剂混合使用。保持YIGSR的含量不变,改变BISAM的含量,得到Gell、Gel2、Gel3、Ge14、Ge15、Gel6、Gel7、Ge18、Ge19凝胶,其中Ge17因双键浓度过低不成胶。IR表明凝胶中既有PLEOF分子成分,也有多肽成分;SEM表明Gell、Ge12、Ge13、Ge14、Ge15、Ge16、Ge18、Ge19凝胶均为多孔网络结构。Gell、Ge14孔径最大,约为100um, Ge12、Ge15、Gel8的孔径约为50umm,Gel3、Ge16、Ge19的孔径最小,孔形状不规则,Ge16、Ge19表面有较多的裂缝;测定凝胶溶胀性能,发现水凝胶的溶胀度主要受交联密度影响,交联密度越小,溶胀度越大。当合成水凝胶的PLEOF大分子单体相同时,凝胶的溶胀度大小关系为:Gell>Gel2>Ge13,Ge14>Gel5>Gel6,Gel8>Gel9。PLEOF水凝胶能够快速溶胀,这是凝胶的网络骨架中亲水性的PEG链段和水凝胶表面可以自由移动的IKVAV多肽链段共同作用的结果;测定凝胶的降解性能,PLEOF水凝胶降解速率均很慢,30天内Gell的质量损失率为16.7%,Gel2为10.3%,Gel3为5.8%,Ge14为29.2%,Gel5为14.7%,Ge16为11.03%,Gel8为9.83%,Ge19为7.02%,其中Ge14的质量损失率最大。水凝胶的交联密度和PLEOF分子中PLA嵌段均对水凝胶的降解速率有影响,交联密度越大,降解速率越小;PLEOF分子中PLA的嵌段比越大,水凝胶的降解速率越大。
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