论文部分内容阅读
荔枝属无患子科(Sapindaceae)荔枝属,荔枝属只有荔枝(Litchi chinensis Sonn.)和菲律宾荔枝(L. philippinensis Radl.)两个种,荔枝是唯一的栽培种,在云南发现2个荔枝变种,即褐毛荔枝(L. chinensis var. fulvosus YQ Lee)和光头荔枝(L. chinensis var. spontaneous Pei)。中国是荔枝的起源与驯化中心,也是目前国际上最主要的荔枝生产国,年总产量占到95%左右,栽培面积在60万hm2以上。本研究在开展福建荔枝栽培品种资源调查的基础上,运用ISSR分子标记,研究了78份荔枝样品的遗传多样性,为福建省荔枝种质资源的有效保护和合理利用提供科学依据,为荔枝新品种的培育提供遗传背景。主要研究结果如下:1.针对荔枝富含酚类化合物和多糖等物质导致DNA提取和纯化困难的问题,采用经过改良的SDS法提取的荔枝DNA,不论从数量还是纯度上均可满足RAPD分析要求,摸索提出了合适的荔枝DNA提取方法。2.研究建立了荔枝ISSR-PCR反应的技术体系。20μL的反应体系中采用20 ng的模板DNA,0.15μmol/L ISSR引物,1.25 U Taq DNA聚合酶,0.15μmol/L dNTP,以及54～56℃的复性温度为荔枝1SSR-PCR扩增条件的最佳选择。按照此体系,94℃预变性5 min;94℃变性30 s;退火1 min;72℃延伸1.5 min.循环40次;然后72℃延伸7 min。该体系扩增出的条带清晰,效果良好,能够满足ISSR分析。3.从96个引物中筛选出11个ISSR引物,对78份荔枝样品进行了ISSR分析。共扩增出127条带,其中多态性为122条,多态性百分率为96.06%。同时发现序列为(AG)n、(CA)n、(AC)n的引物扩增出的条带多态性较高,其所占比例也最高。说明荔枝基因组中(TC)n、(GT)n、(TG)n含量丰富。4.依据ISSR分析结果,对供试的78个品种进行聚类分析,结果表明:它们之间的遗传相似系数在0.454～0.985之间,揭示了不同品种之间遗传多样性、遗传相似性与亲缘关系,为以后荔枝远缘杂交,获得优质荔枝品种提供了依据,提高育种效率奠定了一定的理论基础。5.解决了古荔枝与现在栽培荔枝品种的关系;解释了品种间同名异物、同物异名的问题;解释了生产上有些品种性状不稳定的问题。