论文部分内容阅读
背景:血管并发症是糖尿病患者致残、致死的主要原因,其发生机制是复杂多样的,其中"炎症学说"得到了广泛的认可,各类炎症因子对糖尿病并发症的作用得到了进一步的证实。细胞核因子-kB(Nuclear factor kappa B,NF-kB)、可溶性细胞间粘附分子-1(Soluble Intercellular Adhesion Molecule-1,sICAM-1)均为重要的炎症因子。而最新研究表明,微小RNA(MicroRNAs,miRNAs)作为调控细胞功能的关键因子,调节促炎因子及抑炎因子的表达,参与炎症的发生发展过程,并起关键调控作用。miRNAs是一组长度约22nt的内源性非编码单链RNA(ncRNA),其可通过结合靶基因3’端非翻译区,降解靶mRNA或者阻制靶mRNA的翻译。mi R-155作为一个具有炎性作用多种功能的miRNA分子,在低度炎症性疾病中扮演着重要角色。但miR-155在2型糖尿病(T2DM)患者外周血的表达和对于T2DM慢性血管病变发病机制的参与及调控作用的研究还很少。目的:本研究通过检测T2DM患者外周血miR-155、NF-kB、sICAM-1mRNA的表达,分析其变化情况,探讨miR-155与NF-kB、sICAM-1的关系,和在T2DM慢性血管病变发生发展中可能的作用及机制,为研究T2DM血管并发症找到新的切入点,为临床寻找新的治疗手段提供理论依据。方法:选取T2DM(根据WHO1999年诊断和分型标准)患者65例,男35例、女30例,年龄61.79±10.55岁,病程11.73±7.93年,HbA1c(12.50±8.09)%。根据HbA1c水平将其分为:HbA1c<7%组、7%≤HbA1c<9%组、HbA1c≥9%组;按糖尿病病程分为病程<10年组、10年≤病程<20年组、病程≥20年组;按照T2DM慢性血管并发症有无及类型分组:单纯T2DM无血管病变组(A组)、血管并发症组(B组),B组再进一步分为微血管病变组(B1组)、大血管病变组(B2组)、同时有微血管病变和大血管病变组(B3组);将T2DM血管病变患者依据24h尿微量白蛋白定量分组:<30mg/24h为尿白蛋白正常组、30-300mg/24h为微量白蛋白尿组、≥300mg/24h为大量白蛋白尿组。所有患者均无糖尿病急性并发症,无感染、肿瘤、原发肝脏疾病和非糖尿病性肾脏疾病等。选择年龄、体重指数(BMI)相匹配的健康人30例作为对照组,男14例、女16例,血糖、血脂、血压均正常。测定所有研究对象血压、身高、体重,计算BMI,并空腹8小时后晨起取肘静脉血,测定空腹血糖(FG)、糖化血红蛋白(HbA1c)、谷丙转氨酶(ALT)、总胆红素(TBIL)、总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)、低密度脂蛋白(LDL)、血尿酸(UA)、尿素氮(BUN)、血肌酐(Scr);采用Realtime RT-PCR法检测外周血miR-155、NF-κB、sICAM-1mRNA的表达量;T2DM血管病变患者留24h尿标本测定微量白蛋白(24h-mAlb)水平。结果:1.T2DM组miR-155、NF-κB、sICAM-1mRNA的表达均显著高于对照组(P均<0.05)。HbA1c≥9%组和病程≥20年组mi R-155、NF-κB、sICAM-1mRNA的表达均显著高于HbA1c<7%组和病程<10年组(P均<0.05);miR-155在7%≤HbA1c<9%组也明显高于HbA1c<7%组(P<0.05),sICAM-1在HbA1c≥9%组或10年≤病程<20年组也显著高于7%≤HbA1c<9%组或病程<10年组(P均<0.05)。2.T2DM血管病变组(B组)miR-155、NF-κB、s ICAM-1mRNA的表达显著高于单纯T2DM无血管病变组(A组)(P均<0.05)。B3组miR-155的表达较B2组和A组均显著升高(P均<0.05),B1组、B2组较A组也有升高,但差异无统计学意义(P均>0.05);B1组、B2组、B3组NF-κBmRNA表达均显著高于A组,且B3组也明显高于B1组和B2组(P均<0.05);B1组、B3组sICAM-1mRNA的表达显著高于A组(P均<0.05)。微量白蛋白尿组和大量白蛋白尿组miR-155、NF-κB、sICAM-1mRNA表达均明显高于尿白蛋白正常组,且大量白蛋白尿组miR-155、sICAM-1mRNA的表达也显著高于微量白蛋白尿组(P均<0.05)。3.多元相关分析显示:miR-155与HbA1c、TG、NF-κB、sICAM-1明显相关(P均<0.05);多元逐步回归分析显示:miR-155与NF-κB、sICAM-1呈正相关(P均<0.05)。结论:T2DM患者miR-155表达增高,并随病程延长、HbA1c水平升高而表达明显增多。miR-155、NF-κB、sICAM-1的表达在血管病变组明显高于无血管病变组,在微血管病变并大血管病变组或大量白蛋白尿组,其升高更显著;多元逐步回归分析示mi R-155与NF-κB、sICAM-1明显相关,均提示mi R-155可能参与了糖尿病血管病变的发生发展,miR-155与NF-κB、sICAM-1关系密切,炎症是糖尿病慢性血管病变发生发展的重要机制之一。