论文部分内容阅读
目的:观察大鼠单耳高强度噪声暴露后双耳听力阈值的改变以及噪声暴露后双侧听皮层各解剖层次GABABR1蛋白表达水平的改变，研究噪声暴露对于大鼠听皮层中GABABR1表达水平的影响，探讨噪声暴露介导的听力损害、听觉功能异常及耳鸣等发生、发展的可能机制。 方法:将39只9周龄雄性SD大鼠随机分为空白对照组、单耳暴露组、双耳暴露组（13只/组）。单耳暴露组大鼠左耳暴露于中心频率为12 kHz,带宽为100 Hz的127 dB SPL窄带噪声环境中2小时，同时右耳给予隔音耳塞保护；双耳暴露组大鼠依次暴露左耳、右耳于噪声环境中2小时，暴露时给予对侧耳隔音耳塞进行保护。分别于噪声暴露前以及暴露后第7天对三组实验动物进行双耳听性脑干诱发电位测试（Auditory Brainstem Response，ABR）,分析其听力阈值改变情况；并于噪声暴露第7天，应用蛋白免疫印迹技术（Western Blotting）以及免疫组化技术检测各组动物双侧听皮层GABABR1蛋白表达水平，分析噪声暴露对于双侧听皮层目标蛋白的影响。 结果:1）听力阈值改变：噪声暴露后，暴露耳ABR阈值明显提高。单耳暴露组左耳在8 kHz、12 kHz、16 kHz、20 kHz、24 kHz、32 kHz听阈分别提高了64.6±2.4、67.5±3.3、69.3±1.8、65.4±3.7、57.9±4.3、54.6±3.7 dB SPL，各频率ABR听阈差异具有显著性（P<0.05）；双耳暴露组左耳在各检测频率听阈分别提高了64.3±1.8、67.1±3.2、69.3±1.8、63.9±4.9、60.0±2.8、55.4±3.7 dB SPL，同时，右耳各频率听阈分别提高了63.4±3.1、66.4±2.3、68.6±2.3、64.6±3.7、59.6±5.0、53.9±4.0 dB SPL，双侧耳在给予噪声暴露后各频率阈值改变均具有统计学差异（P<0.05）；空白对照组大鼠双耳以及单耳暴露组大鼠右耳（掩蔽耳）各检测频率ABR阈值噪声暴露前后对比改变不明显，差异无显著性（P>0.05）。 2）GABABR1蛋白表达水平改变：噪声暴露后第7天，单耳暴露组与空白对照组相比，GABABR1在左侧听皮层的表达量明显的下降，差异具有统计学意义（P<0.05），目标蛋白在右侧听皮层表达水平虽有轻度的降低，但差异无显著性（P>0.05），此外，单耳暴露组大鼠左侧听皮层 GABABR1表达水平相比右侧听皮层明显减少，差异有统计学意义（P<0.05）；双耳暴露组与空白对照组相比，双侧听皮层GABABR1表达量均明显下降，差异均具有显著性（P<0.05）；单耳暴露组与双耳暴露组相比，后者左侧听皮层GABABR1表达量表现出比前者更低的水平，差异具有显著性（P<0.05）；在听皮层各解剖层次，单耳暴露组以及双耳暴露组与空白对照组相比，在第V层和第VI层GABABR1表达量明显下降，差异具有统计学意义（P<0.05）。 结论:大鼠在接受为期2小时126 dB SPL的高强度噪声暴露后，暴露耳的听力水平明显下降。本研究在大鼠暴露后第7天时，应用蛋白免疫印迹技术和免疫组化技术对大鼠双侧听皮层GABABR1蛋白表达量进行检测，发现目标蛋白在噪声暴露同侧听皮层的表达水平明显下降，其中，在初级听皮层第VI层表达量下降最明显，噪声暴露对侧听皮层目标蛋白的表达也产生了较小的影响。本研究提示我们，听平层GABABR1蛋白表达水平的下降可能参与了噪声介导的听力损失发生、发展机制。