小鼠足趾来源前体细胞的分离、鉴定及其在再生中的作用

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目的:通过观察小鼠足趾末节离断后的再生过程,初步探讨参与该过程的前体细胞的特性,及其在损伤修复和再生中的作用。方法:1.将新生小鼠足趾自中节趾骨近端切下后,通过XI型胶原酶消化分离细胞,通过培养,分化,PCR,免疫荧光及免疫化学检测,初步鉴定细胞性质。2.新生3天小鼠,戊巴比妥(50mg/kg体重)腹腔注射麻醉后,用显微剪将小鼠右侧后肢足趾(2,3,4趾骨)末节中点处截断,左侧后肢足趾留作对照组,观察两组生长过程,并于截趾后不同时间点取材进行HE染色及免疫荧光检测;结果:1.借鉴皮肤源性前体细胞培养方法[1],分离培养的细胞表达Sox2, Bmi1,Notch1, Nestin等干细胞或前体细胞标志物,且具有自我更新及多向分化能力,可传代培养3~5次,并且可以向神经元细胞,雪旺细胞,软骨细胞等方向分化,故将其命名为足趾来源前体细胞(Digit Tip Derived Precursors,DTDPs)。2.新生小鼠截趾后3~4周,可以再生出完整的足趾结构,在再生过程中可检测到趾端皮肤及皮下组织Sox-2阳性细胞表达增多。结论:通过初步研究,我们发现从足趾来源前体细胞具有一定的干细胞学特性;足趾再生及创伤修复过程可能与足趾来源前体细胞定向分化有关。
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