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目的：原发性肝癌是我国最常见的癌症之一，同时又是最难治疗的癌症之一。统计资料表明，全世界每年约45％新发病的肝癌病例在我国大陆。由于其起病隐匿，早期缺乏典型症状，一旦发现多已进入中晚期，预后极差。近20年来肝癌的病死率呈现上升趋势，我国肝癌的总体五年生存率为2.7％，肝癌已成为我国第二位恶性肿瘤致死原因。由于我国数量可观的人群有HBV/HCV感染等肝癌发生的背景，新世纪我国肝癌高发的形势仍将十分严峻。
目前临床对肝癌的治疗主要采取手术、放射治疗和药物化疗的方法。手术治疗，迄今仍被认为是肝癌的首选疗法，其疗效的好坏除与肿瘤因素有关外，还与肝功能情况以及健康状况密切相关。肝癌根治性切除术术后5年复发率为61.5％，即单靠手术治疗并不能完全切除癌肿和防止肝癌的复发和转移，而且往往给患者带来身体上的痛苦；放射治疗可使患者产生骨髓抑制、消化道反应、免疫力下降等严重不良反应；化疗是目前治疗肝癌最常用的方法，但是它对肿瘤细胞的选择性抑制作用不强，全身用药毒副性较大。以上各种治疗方法均给机体带来了不同程度的损伤，如何提高肝癌治疗的总体疗效，已成为医学界探讨的热点问题。
随着科学技术的发展，具有我国传统特色的中医药在肝癌治疗中显示了无可比拟的优势。而细胞凋亡又是调节肿瘤细胞生长速率的重要方式，自八十年代以来，人们越来越认识到，很多肿瘤不仅细胞增殖率很高，而且其细胞死亡速率很低，即是由细胞增殖与死亡平衡失调造成的。在肿瘤组织中，通常可以看到两种细胞死亡的形式，即坏死性细胞死亡和细胞凋亡。后者是由于外因或内因的作用引起细胞自杀造成的，肿瘤细胞的增殖率与细胞凋亡速率处于一种相对平衡状态，此平衡状态决定着肿瘤生长速率。因此通过人为的直接或间接干预而改变肿瘤组织的内环境，打破肿瘤自身形成的细胞增殖与凋亡的平衡态，进而使肿瘤细胞发生增殖逆转，也就是诱导肿瘤细胞凋亡，已成为肿瘤治疗研究的新途径。其基本特点不是直接杀伤肿瘤细胞，而是诱导肿瘤细胞凋亡。自从1992年Dive提出将诱导肿瘤细胞凋亡作为以后肿瘤治疗研究中的主要目标与手段，至今诱导肿瘤细胞凋亡已成为国际肿瘤治疗中的研究热点。我国学者近几年来，即已开始进行中药诱导肿瘤细胞凋亡的研究。现代分子生物学技术与中药方剂治疗肿瘤相结合的研究是揭示中医治疗肿瘤机理的主要措施。已有资料表明，在实验研究中发现一些中药提取物及复方中药在体外及体内抗肿瘤治疗试验中可诱导肿瘤细胞发生凋亡，并可影响肿瘤细胞的某些基因表达变化。
本实验采用由河北省中医院毛宇湘主任医师根据多年临床经验拟定的复肝春6号(FGC-6)方剂，观察了FGC-6体外诱导肝癌H22细胞凋亡的作用，目的在于从细胞水平、分子水平探讨该方剂抗肝肿瘤作用的机制，为其临床应用提供理论依据。
方法：将FGC-6制成水煎剂，过滤，最后用微孔滤膜过滤除菌。药物浓度以生药计。FGC-6对肝癌H22 细胞的半数致死量浓度确定和抑制率试验设6个组，每组8个重复。采用96孔板培养，将小鼠肝癌H22细胞浓度调整为1×10<5>个/ml，每孔加入150μl，37℃、5％CO<,2>饱和水汽细胞培养箱中培养24 小时后，阳性对照5-Fu组加入5-Fu(50ug/ml)50μl。正常对照NS组加入培养液50μl。FGC-Ⅰ组加入300 mg/ml药物50μl。FGC-Ⅱ组加入200 mg/ml药物50μl。FGC-Ⅲ组加入100mg/ml药物50μl。FGC-Ⅳ组加入50 mg/ml药物50μl。共同培养24小时后，测定其OD<,492>，求其平均值，计算半数致死量和抑制率。生长曲线法检测药物对体外培养H22细胞增殖抑制作用试验分为5个组，其中3个药物浓度组(mg/ml)，分别为FGC-Ⅰ组(480 mg/ml)、FGC-Ⅱ组 (240 mg/ml为半数致死量浓度)、FGC-Ⅲ组(120mg/ml)和阳性对照5-Fu(50ug/ml)组、正常对照(NS)组。每组21个重复。按上述方法培养24小时后，分别加入不同浓度的药物。共同培养，每隔24小时收获一次，每天每组收获3孔，混匀后用台盼蓝染色计算活细胞数。取平均值，连续检测7天。以每ml拒染的活细胞数与培养时间作图绘制生长曲线。
另将试验设4个组，其中2个FGC-6药物浓度组，分别为FGC-Ⅰ组(480 mg/ml)、FGC-Ⅱ组(240 mg/ml)。和阳性对照5-Fu(50ug/ml)组、正常对照NS组。调整小鼠肝癌H122细胞浓度为1×10<5>个/ml，取7.5 ml于培养瓶中培养，37℃、5％CO<,2>饱和水汽二氧化碳细胞培养箱中培育24小时后，分别加入不同浓度的药物以及对照液各2.5 ml。共同培养48小时后，收获细胞进行DNA ladder分析、细胞周期及凋亡率和超微形态结构分析。对癌细胞的凋亡进行多方面、多角度的分析，以进一步探讨肿瘤细胞凋亡的发生机制。
结论：
1.复肝春6号对体外培养H22细胞的增殖有明显的抑制作用。
2.复肝春6号可以使体外培养的H22细胞染色体DNA在核小体连接处断裂，造成DNA损伤，导致肿瘤细胞凋亡。
3.复肝春6号可将体外培养 H22细胞阻滞在细胞周期的G1/G0期。使细胞增殖分化受到抑制，出现细胞凋亡。
4.电镜观察，复肝春6号可导致H22细胞的细胞核染色质高度凝聚、边缘化等超微结构发生改变，进而细胞发生凋亡。