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香蕉炭疽病造成香蕉果实采后损失严重。大量长期使用化学农药防治病害已对环境和人类健康造成严重威胁,研发非化学农药是目前防治果蔬采后病害的研究热点之一。多聚半乳糖醛酸酶抑制蛋白(PGIP)是一种胞壁降解酶的抑制剂,在控制病害的作用中,不但可抑制致病微生物相关酶的活性,而且与诱导植物防卫反应和增强植物抗病性有关。目前果实上克隆的PGIP基因,以温带水果为多,少见对热带亚热带果实PGIP基因序列的报道本文研究了新型诱抗剂苯丙噻二唑(benzothiadiazole,BTH)对香蕉炭疽病菌的抗病效果及其对相关生理代谢的诱导作用,克隆了香蕉PGIP基因、ACO基因,研究了BTH对PGIP基因和ACO基因表达的影响,主要研究结果如下:
1.克隆获得了香蕉PGIP基因560 bp大小的cDNA片断序列,并向GenBank递交,接受号为No.DQ417334。香蕉果实PGIP基因的表达随着香蕉果实的后熟而减弱。但香蕉果实贮藏至3 d~7 d时,BTH处理果实的PGIP基因表达明显增强,而对照和施保功处理的香蕉果实明显弱于BTH处理。推测BTH处理诱导PGIP基因表达与增强对炭疽病菌的抗性有关。
2.BTH处理能够在一定程度上抑制香蕉果实ACO基因的表达,延迟果实的软化后熟进程和延长其货架寿命。
3.BTH处理对接种了炭疽病菌果实的病情发展有明显的抑制作用。BTH浓度为200μg·mL<-1>比50μg·mL<-1>的抗病效果更好。BTH处理还明显延缓了香蕉果实的后熟进程,延缓了果实的软化和果皮褪绿,提高了香蕉的商品率,延长了香蕉果实的货架寿命。
4.BTH处理提高贮藏前期果实的呼吸速率,有利于加强果实自身的生理生化代谢水平,增强果实的抗病能力。但BTH处理的香蕉果实乙烯释放量变化和乙烯高峰出现的时间与对照和施保功处理的无明显差异。
5.香蕉果皮的H<,2>O<,2>主要定位于果皮的细胞壁中,200μg·mL<-1>BTH处理显著提高了采后香蕉果实果皮中的H<,2>O<,2>含量,50μg·mL<-1>BTH处理可提高香蕉果实中的H<,2>O<,2>含量,但不如200 μg·mL<-1> BTH处理的效果明显。
6.BTH处理增强了香蕉果实PGIP基因表达和H<,2>O<,2>在细胞壁的积累,抑制了ACO基因的表达, BTH处理后呼吸高峰出现的时间提前,加强了果实的呼吸代谢。推测BTH处理可能是通过诱导相关基因表达和信号传导物质H<,2>O<,2>的积累,加强了抗病物质的合成代谢,增强了果实的硬度,从而增强了抵抗炭疽病菌侵染的能力。