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微生态制剂自20世纪70年代问世以来到现在,它与之前长时间且大范围使用的抗生素相比,有许多优越之处,如不会产生耐药菌株,无残留危害,提高生长性能等作用,而且这些制剂大都是从畜禽肠道或者土壤中分离菌株培养制得,不会污染环境和畜产品等优点,因此它逐渐代替抗生素而得到饲料行业和养殖户的认可。本试验利用地衣芽孢杆菌和乳酸杆菌作为联合菌种制剂,研究其在体外对大肠杆菌的拮抗实验和在体内对肉鸭生产性能、免疫器官指数、肠道菌群及其多样性、血清指数等方面的影响,主要内容如下:1.乳酸杆菌的筛选:从健康鸡肠道内容物分离到5株乳酸菌JJB3、F、SBZ5、K1、K2,经耐酸、耐胆盐、菌体和代谢产物的拮抗大肠杆菌试验,筛选得到耐受性较好且抑菌效果较好的JJB3菌株。2.动物试验:选用72只同品种1日龄樱桃谷肉鸭,按体重相似原则平均分为空白组与实验组G1、G2、G3、G4、G5共6个组,每个组重复12只。空白对照组为常规饲料饲喂组,配合饲料不作任何处理,实验组使用生物发酵饲料(内含乳酸杆菌和芽孢杆菌)饲喂,G1、G2、G3组分别在基础日粮中添加0.1%不同配比的联合培养菌粉(分别为2:1、1:1、1:2),G4、G5组分别在基础日粮中添加0.1%的地衣芽孢杆菌粉(H2)和乳酸菌粉(JJB3)。(1)生产性能:35日龄时,用添加乳酸菌和芽孢杆菌比例为1:1的0.1%联合菌粉的发酵饲料,其饲喂的肉鸭末期体重和平均体重均比平行试验组高,效果显著(P<0.05),与空白对照组相比效果极显著(P<0.01)。(2)血清蛋白指数:35日龄时,添加乳酸杆菌和地衣芽孢杆菌的比例为1:1时的0.1%菌粉的发酵饲料饲喂组,肉鸭体内血清总蛋白和白蛋白指数均明显高于其他组(P<0.05),血清总胆固醇和甘油三酯则无明显差异(P>0.05)(3)免疫器官指数:35日龄时,G2组与G4、G5组的脾脏指数差异显著(P<0.05),其中G2组与空白对照组胸腺指数、脾脏指数和法氏囊指数的差异极显著(P<0.01),说明添加0.1%联合菌粉(1:1)在基础日粮中对提高肉鸭免疫器官指数有效。(4)回肠菌群:35日龄时,与空白对照组相比,G2组乳酸杆菌、双歧杆菌、肠球菌和总厌氧菌数量极显著升高(P<0.01),大肠杆菌和总需氧菌数量极显著下降(P<0.01)。G1、G3、G4、G5组乳酸杆菌、双歧杆菌、类杆菌和总厌氧菌数量显著升高(P<0.05),大肠杆菌、肠球菌和总需氧菌数量显著下降(P<0.05)。结果初步表明,发酵饲料使鸭回肠健康指数B/E值升高。(5) PCR-DGGE技术分析回肠菌群结构及多样性:35日龄时,对照组、饲喂发酵饲料组、单菌种饲喂组的图谱条带分别平均为22.5、18、29、30.5、27和27.5,其中G2、G3和对照组差异极显著(P<0.01),G1与所有其他的组相比差异都极显著(P<0.01),其余组差异不显著(P>0.05),G2和G3组说明添加联合菌种能够更好地保护回肠道内微生物种群的多态性,但是过多的添加菌体或者比例不恰当,也达不到预期的效果。