虫草多糖酶提取及纯化工艺研究和优化

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蝙蝠蛾拟青霉菌Cs-4是典型虫草菌,近年来其发酵产物因多种药效活性广泛用于药品和保健食品。主要活性物质虫草多糖有抗氧化、抗辐射、延缓衰老、免疫调节、降血糖、降血脂、抗肿瘤等功效而备受关注。Pectinase PL醇沉多糖得率明显高于传统水提醇沉,随酶试剂用量、提取时间增加而提高,提取时间2.5 h-3.0 h为宜。25种酶试剂提取醇沉多糖得率较水提醇沉对照组提高2.88%~57.44%。Econase HCP、Pectinase PL和ProteaseN效果最好,多糖得率分别较对照组提高53.90%、57.44%和46.26%,多糖含量也高于对照组。上述三种酶试剂组合酶提取多糖得率较单一酶高出近一倍,两者多糖含量无明显差异,组合酶法提取效果显著优于单一酶法。醇沉多糖得率随提取液浓缩度增加而提高,浓缩度1.5mL:1 g较6.0mL:1 g多糖得率提高33.60%。0.5-6倍量乙醇醇沉多糖,得率随乙醇用量增加而提高,继续增加用量得率降低。醇沉多糖水提液用3%普通型活性炭粉末50~60 ℃下脱色50~60 min效果最佳,脱色结束前5 min加入1.5%高岭土,脱色率82.24%,多糖回收率76.13%。活性炭脱色离心上清液经定性滤纸、0.80 μm微孔滤膜和0.45 μm微孔滤膜三级过滤效果显著。本研究确定虫草多糖分离纯化工业生产技术路线。组合酶法能有效提高多糖利用率,降低生产成本,提高市场竞争力。
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