论文部分内容阅读
目的：贲门癌是我国常见的恶性肿瘤，WHO将穿过食管胃交界区域的腺癌定义为贲门癌，具有自己的解剖学组织学特性和临床表现。目前，贲门癌患者的主要治疗手段是手术治疗，但患者术后的生存期并不乐观，其5年生存率仅为20%左右。贲门癌的组织学类型多为腺癌,对放化疗均不敏感。因此寻找新的治疗靶点，对于提高贲门癌的治疗效果，具有重要的现实意义。过氧化物酶体增殖物激活受体(PPARs)，是一类核转录超家族，它对基因的表达具有调节和转录作用，PPARγ分布在不同的组织中，具有调节细胞的生长、分化、凋亡和代谢平衡等多种生物功能。目前认为PPARγ表达与胃癌的发生、发展和预后相关。PPARγ在胃癌组织中的表达率明显高于正常胃组织中的表达,并随着肿瘤浸润深度的增加，淋巴结转移的发生，临床分期的提高，肿瘤病理分化程度的降低而增高。而在PPARγ与食管癌的关系中，原发性食管癌的食管癌细胞中的PPARγmRNA表达呈现显著下降，认为PPARγ表达下降与食管癌转移与预后不良有关。PPARγ及其配体在食管癌的发生发展和浸润转移中可能同样发挥着抑制作用。但在食管癌与胃癌中，随着肿瘤浸润深度的增加，淋巴结转移的发生，临床分期的提高，远处转移的发生，PPARγmRNA的表达量存在着截然相反的结果，其具体机制尚不明确，有待进一步实验室研究和流行病学证实。目前尚未有针对PPARγ与贲门腺癌的生物学特性关系的研究，本文拟通过研究分析PPARγ在贲门腺癌中的表达及其与贲门腺癌的生物学特性之间的关系。方法：标本采用河北医科大学第四医院胸外科2013年2月-2013年10月间50例手术切除的贲门腺癌组织,以及相应的远癌组织(距离癌组织边缘5厘米以上,手术后证实无癌残留)。贲门癌病理分期按UICC—AJCC胃癌TNM分期第7版（2009），采用免疫组化与Real-time PCR法检测PPARγ在贲门腺癌组织中的表达情况。使用SPSS17.0对数据进行统计分析，对PPARγ蛋白的表达情况选用卡方检验进行统计分析，检测结果以P<0.05有统计学意义。对PPARγmRNA的表达水平采用Mann Whitney U检验，以P<0.05表示差异显著，多组数据间比较采用Kruskal-Wallis H检验，以P<0.05表示差异显著。基因的表达量采用2ΔΔCt法计算。结果:1免疫组化结果：（1）PPARγ蛋白染色阳性信号主要定位于细胞核和（或）细胞浆，阳性细胞在细胞浆和（或）细胞膜有棕黄色颗粒沉着。50例贲门腺癌组织标本免疫组化结果显示：PPARγ蛋白在贲门腺癌组织中的阳性表达24例，阳性表达率为48%，50例远癌组织中阳性表达38例，阳性率为76%。经统计学分析显示两者具有显著性差异χ2=8.319，P=0.004），可以认为PPARγ蛋白在贲门腺癌组织中阳性表达低于远癌组织。（2）统计学分析结果显示，PPARγ蛋白的表达与肿瘤淋巴结转移情况有关（χ2=6.611，P=0.01），与TNM分期有关（χ2=8.552，P=0.014）与有关，与肿瘤分化程度、侵润深度、性别、年龄均无关（P>0.05）。2Real-time PCR结果(1)在50例贲门腺癌组织中，在癌组织中PPARγmRNA中位表达量1.07498，远癌组织中位表达量3.25193。结果显示贲门腺癌组织与远癌组织二者之间PPARγ的表达存在显著性差异（P=0.01），可以认为贲门腺癌组织中PPARγ基因的mRNA表达低于远癌组织。(2)PPARγmRNA的表达量与分化程度有关,其表达量随着贲门腺癌的组织分化程度的降低而减少,高分化腺癌中位表达量1.935745，中分化中位表达量1.168503，低分化中位表达量0.977991，三者存在统计学差异（P=0.013）。与贲门癌的TNM分期有关，Ⅰ期中位表达量为2.487083，Ⅱ期中位表达量1.626207，Ⅲ期中位表达量0.532558，三者存在统计学差异（P=0.01），与淋巴结转移有关,在无淋巴结转移的贲门腺癌组织中PPARγ中位表达量为1.732496，有淋巴结转移的贲门腺癌组织中PPARγ中位表达量为0.62464，两者存在统计学差异（P=0.01）。与侵润深度有关，浸及粘膜层或粘膜下层PPARγ中位表达量为2.151459,浸润固有肌层PPARγ中位表达量为2.114262,侵及浆膜下层PPARγ中位表达量为1.070031，浸透浆膜层,侵及临近器官PPARγ中位表达量为0.966161,存在统计学差异(P=0.01)。(3)与年龄、性别无关（P>0.05）。由于本组病例中接受贲门癌根治性切除的患者中未有远处转移，故未统计PPARγ表达与远处转移两者之间的关系。结论:1PPARγmRNA的表达在贲门腺癌组织中较远癌组织显著降低，与肿瘤的TNM分期、分化程度、侵润深度、淋巴结转移有关，年龄、性别无关。2PPARγ蛋白的表达在贲门腺癌组织中的较远癌组织显著降低，与肿瘤淋巴结转移情况、TNM分期有关，与肿瘤分化程度、侵润深度、性别、年龄无关。3PPARγ在基因水平和蛋白水平的表达均较远癌组织低，但在生物学特性上并未完全一致。提示PPARγ可能参与了贲门腺癌的发生与发展，其在贲门腺癌组织中的表达下调可能提示PPARγ抗肿瘤活性降低或丧失从而促进了贲门腺癌的发生和进展。PPARγ有可能成为判断贲门腺癌预后的指标。