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目的与背景：心肌肥厚可出现于各种心血管疾病的发展过程中,如高血压、心肌缺血、肥厚性心肌病等,可进展为心肌纤维化、心力衰竭。研究发现肾素一血管紧张素系统(RAS)中的血管紧张素Ⅱ (AngⅡ)在心肌肥厚的发生发展中起重要作用。Apelin是一种脂肪因子,与AngⅡ具有同源性,是RAS系统的新成员。Apelin与其G蛋白偶联的受体APJ已被证实可以舒张外周血管,降低血压,与AngⅡ的生理作用相反。本研究旨在探讨apelin对AngⅡ诱导的心肌细胞肥大的作用,以及其细胞内信号转导机制。方法：培养1-3d新生Sprague-Dawley大鼠心肌细胞,给予血管紧张素Ⅱ刺激。血管紧张素Ⅱ刺激肥大基础上给予不同浓度apelin。测定[3H]亮氨酸掺入量、细胞表面积以及总蛋白表达量评价心肌细胞肥厚程度。激光共聚焦显微镜扫描分析细胞内静息游离钙水平。免疫印迹法(western blot)测定细胞内B型尿钠肽(Brain natriuretic peptide, BNP)、β肌球蛋白重链(Beta myosin heavy chain, p-MHC)、活化T细胞的核因子3(nuclear factor3of activated T cells, NFATc3)、钙调神经磷酸酶(calcineurin)、磷酸化钙调神经磷酸酶(phospho-calcineurin)、钙调蛋白依赖的蛋白激酶Ⅱ (calmodulin kinase Ⅱ,CaMK Ⅱ)、磷酸化钙调蛋白依赖的蛋白激酶Ⅱ(phospho-CaMK Ⅱ)的蛋白表达水平。RT-PCR法测定BNP和β-MHC mRNA表达水平。结果：Apelin可以抑制血管紧张素Ⅱ在体外诱导的心肌细胞肥大,其作用呈剂量依赖性。Apelin浓度为1000nmol/l时,其抑制心肌细胞肥大的作用最强。同时,apelin可以抑制AngⅡ诱导的细胞内静息游离钙水平升高,BNP和β-MHC mRNA表达水平升高,BNP、β-MHC、NFATc3、磷酸化钙调神经磷酸酶、CaMK Ⅱ和磷酸化CaMKⅡ的蛋白表达水平升高,均与apelin浓度呈剂量依赖性。结论：本研究表明apelin可以抑制AngⅡ在体外诱导的心肌细胞肥大,其机制与Ca2+依赖的钙调神经磷酸酶信号转导通路有关。目的与背景：肥厚型心肌病(Hypertrophic Cardiomyopathy, HCM)是一种遗传性心血管病,表现为心肌肥厚,心肌纤维化以及心力衰竭,是青年人群中心源性猝死常见的原因之一。研究发现肾素一血管紧张素系统(RAS)中的血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)在HCM心肌肥厚的发展中起重要作用。血管紧张素受体拮抗剂(ARB)可拮抗HCM心肌纤维化,但疗效有限。Apelin是一种脂肪因子,与Angll具有同源性,是RAS系统的新成员。Apelin与其G蛋白偶联的受体APJ已被证实可以增强心肌收缩力及舒张外周围血管,与Angll的生理作用相反。本研究旨在探讨apelin对HCM转基因小鼠心肌纤维化的作用,以及其细胞内信号转导机制。方法：选取16只成年cTnT-Q92转基因小鼠,分为安慰剂组(生理盐水)和apelin处理组(0.1umol/kg/天),另取8只非转基因小鼠作为空白对照组。处理前及处理8周后分别行超声心动图检查。8周后取心肌组织切片胶原染色检测胶原体积分数(CVF)、心肌细胞排列。免疫组织化学法检测心肌组织collagen1α1, smads2,3,7和转化生长因子β1(TGF-β1)的表达。分别以免疫印迹(Westernblot)法和RT-PCR法检测心肌组织collagen1α1,1α2,3α1,TGF-β1和smad2,3,7的蛋白表达水平和mRNA表达水平。结果：三组小鼠基础数据无明显差异。超声心动图检测表明,与安慰剂组比较,apelin处理8周后cTNTQ92转基因小鼠心脏舒张功能明显改善。组织切片胶原染色表明apelin处理后CVF明显下降(P<0.01),心肌细胞排列紊乱改善(P<0.05)。免疫组化分析表明apelin处理转基因小鼠后,与安慰剂组比较,collagen lal, smads2,3和TGF-β1表达水平明显下降(P<0.01),而Smad7水平升高(P<0.01)。Westernblot和RT-PCR分析表明apelin处理8周后,与安慰剂组比较,collagen1α1,collagen1α2, collagen3α1, smads2,3和TGF-β1表达水平明显下降(P<0.05),而Smad7水平升高(P<0.05)。结论：本研究表明apelin可以改善肥厚性心肌病cTNTQ92转基因小鼠心肌纤维化,其机制与TGFβ-smads信号转导通路有关。