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背景:胃癌(gastric cancer,GC)是中国最常见的恶性肿瘤之一,在所有癌症中,其发病率居我国第二位,死亡率为第三位。由于早期诊断率低、分化程度低、转移率高,与其它肿瘤如肺癌、乳腺癌相比,胃癌的5年生存率近年来改善的不多。因此,胃癌依然是危害人类健康的主要肿瘤。HEF1(Human Enhancer of Filamentation 1)是接头蛋白CAS(Crk-associated substrate)家族成员,其在生理作用机制方面与CAS类似,提示HEF1在调控分化方面可能有重要作用。目前HEF1在胃癌分化方面的分子机制研究较少。因此,本课题主要探究HEF1在胃癌组织和细胞中的表达与预后价值以及其调控胃癌细胞分化的分子机制。方法:本研究中,我们收集了108例胃癌患者信息及组织标本,根据免疫组织化学染色情况,采用Cox比例风险回归模型进行单因素和多因素分析,采用Kaplan-Meier法绘制生存曲线,以探讨HEF1表达与临床病理参数以及胃癌患者预后的关系。为了分析HEF1和胃癌细胞分化的关系,采用实时荧光定量PCR方法(qRT-PCR)检测胃癌分化标志物(CD133和E-cadherin)的表达变化。采用蛋白免疫印迹法(Western blot)分析HEF1在胃癌细胞中的表达情况。采用荧光定量PCR方法筛选Wnt信号通路中相关的Wnt配体。酶联免疫吸附实验分析Wnt配体表达情况,以探讨HEF1表达和Wnt配体的关系。为了判断HEF1和β-catenin入核情况的关系,采用蛋白免疫印迹法分析β-catenin的表达变化。采用细胞免疫荧光方法检测Wnt信号通路中主要因子Wnt5a、β-catenin、c-myc和Cyclin D1的表达变化,以探究HEF1与Wnt信号通路的关系。采用荧光定量PCR方法检测胃癌分化标志物(CD133和E-cadherin)的表达变化,以探究Wnt信号通路和胃癌细胞分化的关系。结果:与正常邻近胃组织相比,胃癌组织中的HEF1表达水平较高。HEF1在分化好的胃癌组织中表达较弱,而在分化差的胃癌组织中表达较强。所有临床病理参数中,肿瘤分化与HEF1表达具有显著的相关性(P<0.001),与其他参数没有显著性差异。HEF1高表达的胃癌患者死亡风险更高(HR:2.431,95%CI:1.273-4.640,P=0.007;HR:2.052,95%CI:1.026-4.103,P=0.042)。HEF1高表达的胃癌患者比HEF1低表达的胃癌患者无病生存时间和总生存时间短(中位无病生存时间分别为:37.6个月和63.7个月,Log Rank χ~2=8.89,P<0.01;中位总生存时间分别为:43.8个月和65.3个月,Log Rank χ~2=14.57,P<0.01)。HEF1在分化差的胃癌细胞比分化好的胃癌细胞中表达水平高(P<0.05),HEF1表达与胃癌细胞分化相关,HEF1调控胃癌细胞分化。上调HEF1可以增加Wnt5a的表达以及β-catenin的核易位(P<0.05),从而介导Wnt信号通路中的下游靶基因的表达变化。此外,Wnt信号通路可以调控胃癌细胞分化(P<0.05)。结论:因此,研究结果表明HEF1在分化差的胃癌组织和细胞中表达更高。HEF1表达与胃癌患者预后相关,可能是胃癌患者独立的预后因素。特别是,HEF1可能通过Wnt5a/β-catenin信号通路调控胃癌细胞分化。