论文部分内容阅读
顺铂作为目前国际上使用最广泛的一类抗癌药物,其作用机理一直以来都得到许多科学工作者的重视。在细胞内的物种中,目前普遍认为DNA是顺铂作用的主要靶向分子。顺铂和DNA发生作用时,主要产生链内和链间交联产物。前人发现,顺铂与DNA同一条链上的GG、AG、GNG位点配位结合从而导致DNA链产生扭曲。这样的交联作用使得DNA复制转录失败,最终导致癌细胞的凋亡。文献中有关顺铂与DNA的序列选择性研究都有非常大的随意性,序列的选择是人为设定的。我们尝试着采用SELEX技术(一种近年来兴起的体外筛选核酸技术),并以顺铂及其类似物作为靶分子,从含有随机位点的寡聚核苷酸库中筛选出与顺铂有选择性结合的DNA序列,希望对顺铂药理上的研究和应用能有所拓展。现在已经完成的有文献搜集、SELEX草案的设计、随机序列的设计以及筛选实验所涉及的各种生化实验手段掌握,并对筛选实验进行了初探。以上是我研究生期间工作内容之一。
DNA在生理条件(37℃,PH=7.4缓冲溶液)下是相当稳定的,其磷酸二酯键水解的半衰期达百万年以上。因此对于基因工程来说,找到能够催化DNA断裂的核酸切割酶或磷酸二酯键水解酶是非常有应用价值的。虽然DNA对于水解作用是稳定的,但却很容易通过氧化或是自由基的反应而导致链的断裂。利用这一点,从事生物无机研究的科研工作者化学合成一些配合物,这些配合物在氧化剂或还原剂的存在下具有催化DNA链断裂的性质,D.Sigman将其称为化学核酸酶(chemical nuclease)。在化学核酸酶中,犹以铜的配合物较多。以此为目的,本实验室合成了一系列新型铜配合物,用琼脂糖凝胶电泳的手段研究了这些铜配合物切割质粒DNA的活性,这是我研究生期间的另一部分工作。通过以上研究发现了多个具有核酸活性的铜的配合物体系。