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目的:初步探讨大鼠结核性创面液化坏死高峰期中M1/M2型巨噬细胞浸润情况及IFN-γ、IL-10细胞因子和巨噬细胞极化之间的关系。方法:1、35只雌性8周龄SD大鼠,选取结核菌纯蛋白衍化物(PPD)试验无反应或弱反应的30只大鼠,采取MP弗氏完全佐剂致敏;6周后采用随机数字表法分为实验组和阴性对照组,每组各15只;实验组背部皮内注射牛分枝杆菌减毒株(BCG)(5×10~7CFU/ml、0.2ml/只),阴性对照组背部皮内注射无菌的PBS(0.2ml/只)。2、大体观察创面演变情况;于注射后2、6、11d,行皮肤组织石蜡包埋切片(每个时相点每组取5只大鼠),苏木精-伊红染色观察各组创面愈合的情况及愈合过程中炎症细胞的浸润变化;病原微生物学检测鉴定菌株。3、液化坏死高峰期(注射后6d),行免疫组织化学染色,CD68标记巨噬细胞,其亚型M1型巨噬细胞iNOS标记、M2型巨噬细胞CD206标记,通过免疫组织化学方法分析M1型和M2型巨噬细胞在实验组及阴性对照组中的分布情况。4、液化坏死高峰期(注射后6d),分别从阴性对照组和实验组皮肤组织提取总RNA,采用RT-PCR分析促炎症细胞因子IFN-γmRNA和抗炎症细胞因子IL-10mRNA在局部组织中的表达情况。5、数据比较采用独立样本t检验。结果:1、经致敏大鼠,皮内注射BCG后创面观察到明显的红肿、液化、坏死和破溃等改变;苏木精-伊红染色显示液化坏死渐进增强后进而有效愈合的病理过程;抗酸染色结果:阳性。2、免疫组织化学显示:实验组创面组织液化坏死高峰期中CD68巨噬细胞、iNOS M1型巨噬细胞、CD206 M2型巨噬细胞数量分别为(84.8±3.4)、(60.8±2.8)、(13.2±2.2)个/HP,均显著高于阴性对照组(1.4±0.5)、(0.4±0.5)、(0.6±0.5)个/HP,差异均有统计学意义(t=93.2、95.5、28.2,Ρ值均小于0.05);创面组织中iNOS M1型巨噬细胞[(60.8±2.78)个/HP]显著高于CD206 M2型巨噬细胞[(13.2±2.18)个/HP],差异有统计学意义(t=27.6,Ρ<0.05)。3、RT-PCR显示:液化坏死高峰期局部组织微环境中,实验组促炎症细胞因子IFN-γmRNA的表达较阴性对照组明显上调(t=23.9,Ρ<0.05);抗炎症细胞因子IL-10mRNA表达较阴性对照组明显下调(t=16.2,Ρ<0.05)。结论:1、经过致敏的大鼠注射高浓度BCG可有效诱导液化和坏死,可成功构建大鼠结核性创面模型;2、大鼠结核性创面液化坏死高峰期,创面组织局部微环境中,促炎症细胞因子IFN-γ占主导优势时,以M1型巨噬细胞表达为主,有利于发挥巨噬细胞杀灭结核分枝杆菌的作用。