盾叶薯蓣细胞培养工艺优化及结构动力学模型的初步研究

来源 :南京工业大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:mscspn
下载到本地 , 更方便阅读
声明 : 本文档内容版权归属内容提供方 , 如果您对本文有版权争议 , 可与客服联系进行内容授权或下架
论文部分内容阅读
盾叶薯蓣(Dioscoreazingberensis C.H.Wright)是我国特有的、具有重要经济价值的药用植物,其次生代谢产物薯蓣皂甙元(diosgenin)是合成甾体激素类药物最重要的前体。为了解决薯蓣资源日渐枯竭的问题,近年来人们尝试使用植物细胞培养技术,大规模培养薯蓣细胞以生产薯蓣皂甙元。但目前的研究仅停留在摇瓶或小试阶段,对培养过程中的动力学研究较少,培养过程中遇到的许多问题仍机理不明,离工业化还有很大的距离。   本文在摇瓶培养条件下,通过对盾叶薯蓣细胞悬浮培养体系选择培养基种类、添加真菌诱导子、优化培养基成分等方法,得到较优的培养条件和较高的薯蓣皂甙元产率。然后在优化的培养条件下,对培养过程中培养基中的碳源、氮源、磷酸盐浓度进行了测定和分析;研究了细胞鲜重、干重、存活率以及薯蓣皂甙元产量的变化情况;在对反应机理做适当探讨和假设的基础上,建立了盾叶薯蓣细胞悬浮培养动力学结构模型。结论归纳如下:   (1)MS培养基是盾叶薯蓣细胞悬浮培养的最适培养基;添加诱导子真菌RE0105使薯蓣皂甙元产量提高了16.8%;进一步优化培养基成分,当KH2PO4204mg/L和NH4NO31836mg/L时,产量又提高了19.7%。   (2)在最佳培养基条件下,盾叶薯蓣细胞悬浮培养周期为14天,单、共培养体系生长情况类似。细胞生长曲线近“S”型,细胞经历了正常生长、膨胀、裂解三个阶段。薯蓣皂甙元只在2~6天合成,产物合成为生长部分相关型。培养基中碳源和氮源的吸收与细胞生长紧密相关。对细胞的得率系数分别为单培养YX/C=0.476g·g-1 YX/N=3.7041g·g-1;共培养YX/C’=0.4528g·g-1、YX/N’=3.332g·g-1。培养基中磷酸盐的吸收不与细胞生长同步,但胞内磷的消耗与细胞的生长同步。   (3)基于以上研究,运用解释结构模型法,建立了盾叶薯蓣细胞悬浮培养动力学结构模型。在Matlab7.0中运用遗传算法与fminsearch函数相结合获得较精确的最优化参数。最终模型为:   (5)该模型能够很好的模拟细胞培养2~10天内的动力学特性,反应薯蓣皂甙元只在2~6天合成的产物积累特征,但模型对延迟期和限制性底物缺乏的衰亡期预测能力较差。其原因为培养周期内细胞的生长和代谢速率是不一样的,而模型中反应培养过程生理生化特征的参数和细胞对限制性培养基的得率系数却用的定值。2~10天是细胞培养的对数期和稳定期,体系的生长和代谢速率比较稳定,模拟效果较好;而0~2天和10天以后的速率变化比较大引起模型模拟效果不佳。
其他文献
  Purpose: We have reported long term clinical observation of abutment teeth on obturator prostheses in the last ISMR meeting at New Mexico.In order to gain r
会议
仿生氧载体的研究不仅对揭示生物体内氧的可逆键合,活化和氧化反应机制具有重要的理论意义,而且在化学分离氧和温和条件下实现催化氧化反应的高效高选择性等方面都表现出广阔
会议
Maggie总是给自己定下很多计划,便俗话说“计划赶不上变化”,她最后常常由于种种原因而导致计划破产.对此,Brad有何看法呢?Brad碰到计划被打乱时会如何处理?
学位
第一次见到大同先生的水墨作品,那种迹简意淡而自由萧散的气息如同惊鸿一瞥,让人不忘。意笔人物、山水树木与留白处如同几个大空间的纵横叠加,以虚驭实,无画处皆成妙境,既简
针对负载杂多酸催化剂在极性反应体系中活性组分易溶脱的难题,探索用“瓶中造船(ship-in-bottle)”的方法在Y沸石超笼内合成Keggin结构杂多酸,得到的固体样品用X射线衍射仪(XRD
请下载后查看,本文暂不支持在线获取查看简介。 Please download to view, this article does not support online access to view profile.
期刊
环氧氯丙烷是重要的化工原料,其主要合成方法有丙烯高温氯化法和醋酸丙烯酯法。随着生物柴油在世界范围的大规模产业化,副产的甘油产量不断增加,甘油的开发应用成为国内外研究的
  Carbon nanotubes(CNTs)are high-aspect ratio nanomaterials that have increasingly been used for a wide variety of industrial and commercial applications owin
会议