【摘 要】
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目的:探讨成年大鼠海马CA1区毁损后,海马齿状回(dentate gyrus, DG)神经发生区的新生细胞的存活与自噬的关系。并观察齿状回神经发生与学习记忆能力的关系。方法:建立海人酸(
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目的:探讨成年大鼠海马CA1区毁损后,海马齿状回(dentate gyrus, DG)神经发生区的新生细胞的存活与自噬的关系。并观察齿状回神经发生与学习记忆能力的关系。方法:建立海人酸(kainic acid, KA)毁损单侧海马CA1区的脑损伤模型。用5-溴脱氧尿嘧啶核苷(5-bromodeoxyuridine, BrdU)于毁损后三天标记增殖的细胞,免疫组织化学检测BrdU阳性细胞,采用体视学的计数方法计算DG的BrdU阳性细胞总数。用Western blot方法检测自噬特异性抗原LC3(microtubule associated protein-1 light chain 3)、Beclin 1、凋亡相关蛋白Bcl-2的激活水平,用LC3、Beclin 1与BrdU免疫荧光双标的方法检测这些新生细胞的减少是否有自噬的参与,用Y迷宫训练成绩的优劣评定新生细胞的存活与学习记忆能力的关系。结果:假毁损组DG区可见少量的BrdU阳性细胞;与假毁损组比较,实验组在海马毁损后DG区BrdU阳性细胞明显增多(P<0.05),在BrdU给药后第一天最多,随着时间的推移逐渐减少,各组之间有显著差异(P<0.05);Western blot结果显示,与假毁损组比较,实验组在海马毁损后各时间的自噬特性性抗原LC3、Beclin 1水平都明显增高(P<0.05),与假毁损组比较,实验各组的Bcl-2水平都明显降低(P<0.05);各时间点均未见BrdU和LC3、Beclin 1的免疫组化双标细胞;Y迷宫训练结果显示:毁损组成绩较假毁损组较差(P<0.05),随着毁损时间的推移,至毁损后一月左右,毁损组Y迷宫成绩接近假毁损组。结论:成年大鼠海马毁损可增强DG区的神经发生,但新生细胞随着时间的推移逐渐减少,而新生细胞的减少可能与自噬性程序性细胞死亡有关,新生细胞的存活对大脑学习记忆能力的恢复起到一定的作用。
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