石细胞含量是影响梨果实品质的重要指标之一,其主要组成成分木质素的形成既受品种遗传特性影响,同时也受到栽培措施及环境因素的影响。本研究利用生物信息学方法对梨石细胞形成相关HCT基因进行分析,筛选基因家族中与石细胞形成相关的关键基因。同时,克隆了梨的PbMYB85转录因子基因,通过与果实石细胞性状的相关性研究,发现其可能参与调控石细胞合成,并构建了该基因的过量表达载体,转化烟草,以验证其参与木质素合成的调控作用。本文主要研究结果如下:1.通过生物信息学分析方法,在梨全基因组序列中鉴定出82个HCT基因,大部分的HCT基因包含一个或者两个外显子,所有的HCT基因都包含保守结构域HXXXD和DFGWG。根据基因结构特征和进化分析,HCT基因家族可以被分为4个亚家族。结构域分析发现,多个HCT基因含有MYB结合位点。HCT基因家族的扩张在拟南芥与蔷薇科物种分化之前就已经发生,WGD/片段复制事件在HCT基因家族的扩张中起着最重要的作用,同时串联重复事件和近端复制、分散复制事件在HCT基因家族的扩张中起着重要的作用。此外,纯化选择在HCT基因家族的进化中也发挥着关键的作用。通过表达谱及qRT-PCR分析鉴定出6个HCT基因的表达与梨石细胞表达模式相符,是参与石细胞合成的重要候选基因。2.根据QTL区间定位及表达分析筛选出可能参与梨果实石细胞木质素调控的MYB转录因子Pbr041889.1,并根据与拟南芥的同源性将其命名为PbMYB85,其具有MYB转录因子的典型特征,属于MYB转录因子家族。研究表明,梨PbMYB85基因在梨果实动态发育的整个时期呈现表达量先增加后降低的趋势,且与梨果实中木质素及石细胞含量的变化特征呈正相关性,推测其可能参与梨果实石细胞形成的调控。3.通过序列扩增法,克隆了梨PbMYB85转录因子cDNA全长,并构建了过量表达载体pCAMBIA1301-PbMYB85,通过农杆菌介导法转入模式植物烟草中,并获得抗性苗。表达载体pCAMBIA1301-PbMYB85的成功构建及抗性苗的获得,为进一步验证PbMYB85转录因子对梨果实石细胞合成调控的功能研究奠定了基础。